目的:建立預(yù)處理淋巴細(xì)胞樣品后經(jīng)高效液相色譜(highperformanceliquidchromatography,hplc)檢測(cè)淋巴細(xì)胞合成和釋放兒茶酚胺(eateeholamines,cas)的方法,并為淋巴細(xì)胞合成和釋放cas提供直接的證據(jù)。方法:淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液上清經(jīng)氧化鋁吸附,高氯酸洗脫;淋巴細(xì)胞經(jīng)破細(xì)胞,去蛋白,高氯酸提??;采用atlantisc18反相色譜柱分離淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液上清以及細(xì)胞中的cas。電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)。結(jié)果:cas分離效果良好,22min內(nèi)完成測(cè)定,各峰形對(duì)稱(chēng)。雜質(zhì)峰少。用刀豆蛋白a(concanavalina,cona)誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液上清中去甲腎上腺素含量最高,其次是多巴胺.腎上腺素最少;而cona刺激的淋巴細(xì)胞內(nèi)多巴胺的含量最高,其次為去甲腎上腺素,腎上腺素最少。結(jié)論:對(duì)淋巴細(xì)胞樣品進(jìn)行預(yù)處理能提高h(yuǎn)plc檢測(cè)的靈敏度、減少干擾,這種方法可直接檢測(cè)到淋巴細(xì)胞合成和釋放cas。完成機(jī)構(gòu):南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,南通226001