primacell™大鼠嗅鞘細胞試劑盒細胞培養(yǎng)方法;
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用pbs或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%yi酶(t25瓶),使yi酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000rpm左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,t25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000rpm左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用pbs或生理鹽水清洗1-2次,加入1ml 0.25%yi蛋白酶(t25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000rpm左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
子宮成纖維細胞
卵巢上皮細胞
卵巢成纖維細胞
卵巢微血管內(nèi)皮細胞
乳腺上皮細胞
乳腺成纖維細胞
胰島β細胞
甲狀腺濾泡上皮細胞
淋巴內(nèi)皮細胞
淋巴成纖維細胞
扁桃體上皮細胞
扁桃體成纖維細胞
顱蓋造骨細胞
滑膜細胞
骨骼肌細胞
軟骨細胞
破骨細胞
成骨細胞
腦膜細胞
神經(jīng)元細胞
大腦皮層神經(jīng)元
星形膠質(zhì)細胞--中腦
海馬神經(jīng)元細胞
海馬趾神經(jīng)元
海馬星形膠質(zhì)細胞
小腦顆粒細胞
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 顯微鏡