細胞培養(yǎng)用器械的清洗和消毒!
一、玻璃器械的消毒
(一)新的玻璃器皿的洗消:
1、自來水刷洗,除去灰塵。
2、烘干、泡鹽酸:烤箱中烘干,然后再浸入5%*中12小時以除去臟物、鉛、砷等物。
3、刷洗、烘干:12小時后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干。
4、泡酸、清洗:用清潔液(重鉻酸鉀120g:濃硫酸200ml:蒸餾水1000ml)浸泡12小時,然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次,后蒸餾水沖洗3-5次和用雙蒸水過3次。
5、烘干、包裝:洗干凈后先烘干,然后用牛皮紙(油光紙)包裝。
6、高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子,打開開關(guān)和安全閥,當(dāng)蒸氣成直線上升時,關(guān)閉安全閥,當(dāng)指針指向15磅時,維持20-30分鐘。
7、高壓消毒后烘干
(二)舊的玻璃器皿的洗消:
1、刷洗、烘干:使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中,泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈,然后烘干。
2、泡酸、清洗:烘干后泡入清潔液(酸液),12小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗),再用蒸餾水沖洗3次。
3、烘干、包裝:洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝,以便于消毒儲存及防止灰塵和再次被污染。
4、高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi),蓋好蓋子,打開開關(guān)和安全閥,隨著溫度的上升安全閥冒出蒸氣,當(dāng)蒸氣成直線冒出3-5分鐘后,關(guān)閉安全閥,氣壓表指數(shù)隨之上升,當(dāng)指針指向15磅時,調(diào)節(jié)電開關(guān)維持20-30分鐘即可。(玻璃培養(yǎng)瓶消毒前可將膠帽輕輕蓋上)
5、烘干備用:因為高壓消毒后器皿會被蒸氣打濕,所以要放入烤箱內(nèi)烘干備用。
二、金屬器械消毒
金屬器皿不能泡酸,洗消時可先用洗滌劑刷洗,后用自來水沖干凈,然后用75%酒精擦拭,再用自來水,然后用蒸餾水沖洗,再烘干或空氣中晾干。放入鋁制盒內(nèi)包裝好在高壓鍋內(nèi)15磅高壓(30分鐘)消毒,再烘干備用。
三、橡膠和塑料
橡膠和制品通常處理方法是:先用洗滌劑洗刷干凈,再分別用自來水和蒸餾水沖干凈,再用烤箱烘干,然后根據(jù)不同品質(zhì)進行如下的處理程序:
1、針式濾器帽不能泡酸液,用naoh泡6-12小時,或者煮沸20分鐘,在包裝之前要裝好濾膜兩張,安裝濾膜時注意光面朝上(凹向上),然后將螺旋稍微擰松一些,放入鋁盒中在高壓鍋內(nèi)15磅30分鐘消毒,再烘干備用。注意在超凈臺內(nèi)取出使用時應(yīng)該立即將螺旋旋緊。
2、膠塞烘干后用2%氫氧化鈉溶液煮沸30分鐘(用過的膠塞只要用沸水處理30分鐘),自來水洗凈,烘干。然后再泡入鹽酸液30分鐘,再用自來水,蒸餾水,三蒸水洗凈,烘干。后裝入鋁盒內(nèi)高壓消毒,烘干備用。
3、膠帽,離心管帽烘干后只能在2%氫氧化鈉溶液中浸泡6-12小時(切記時間不能過長),自來水洗凈,烘干。然后再泡入鹽酸液30分鐘,再用自來水,蒸餾水,三蒸水洗凈,烘干。后裝入鋁盒內(nèi)高壓消毒,烘干備用。
4、膠頭可用75%酒精浸泡5分鐘,然后紫外照射后使用即可。
5、塑料培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)板,凍存管:
6、其他消毒方法:有的物品既不能干燥消毒,又不能蒸氣消毒,可用70%酒精浸泡消毒。塑料培養(yǎng)皿打開蓋子,放在超凈臺臺面上,直接暴露在紫外線下消毒。也可用氧化乙烯消毒塑料制品,消毒后需要用2—3周時間洗除殘留的氧化乙烯。用20000—100000rad的r射線消毒塑料制品效果好。
為了防止清洗器材已消毒與末消毒發(fā)生混淆,可在紙包裝后,用密寫墨水作好標記。其法即用沾水筆或毛筆沾以密寫墨水,在包裝紙上作一記號,平時這種墨水不帶痕跡,一經(jīng)高溫,即出現(xiàn)字跡,從而可以判定它們是否消毒。密寫墨水的配制:氯化鉆(coc12·6h2o)2g,30%鹽酸10m1,蒸餾水88m1。
四、注意事項
1、嚴格執(zhí)行高壓鍋的操作規(guī)程:高壓消毒時,先檢查鍋內(nèi)是否有蒸餾水,以防高壓時燒干,水不能過多因為其將使空氣流暢受阻,會降低高壓消毒效果。檢查安全閥是否通暢,以防高壓時爆炸。
2、安裝濾膜時注意光面朝上:注意濾膜光滑一面是正面,要朝上,否則起不到過濾的作用。
3、注意人體的防護和器皿的*浸泡:a.泡酸時要戴耐酸手套,防止酸液濺起傷害人體。b.從酸缸內(nèi)撈取器皿時防止酸液濺到地面,會腐蝕地面。c.器皿浸入酸液中要*,不能留有氣泡,以防止泡酸不*。
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