惡臭假單胞菌nd6菌株cata基因的克隆和表達及其兒茶酚裂解途徑探討

發(fā)布時間:2024-03-12
惡臭假單胞菌nd6菌株的萘降解質(zhì)粒pnd6-1中編碼兒茶酚1,2-雙加氧酶的cata基因在大腸桿菌中進行了克隆和表達,并研究表達產(chǎn)物的酶學性質(zhì).結(jié)果表明:酶的km為0.019μmol/l,vmax為1.434μmol/(min·mg);具有很好的耐熱性,在50℃保溫45min后仍能夠保留酶活力的93.7%;fe^2+對酶活性有顯著的促進作用,其比活力是對照反應的292%;酶對4-氯兒茶酚的催化活性非常低,屬于i型兒茶酚1,2-雙加氧酶.以萘為底物生長時,nd6菌株的細胞提取液中既存在催化鄰位裂解途徑的兒茶酚1,2-雙加氧酶活性,也存在催化間位裂解途徑的兒茶酚2,3-雙加氧酶活性.以苯甲酸、對羥基苯甲酸和苯乙酸為唯一碳源生長時,nd6菌株細胞提取液的兒茶酚1,2-雙加氧酶活性遠遠大于兒茶酚2,3-雙加氧酶活性.表明nd6菌株既能通過兒茶酚間位裂解途徑降解萘,也能通過兒茶酚鄰位裂解途徑降解萘,而以苯甲酸、對羥基苯甲酸和苯乙酸為誘導物時只利用兒茶酚鄰位裂解途徑.完成機構(gòu):[1]南開大學生命科學學院,天津300071 [2]南開大學環(huán)境科學與工程學院,天津300071 [3]南開大學生物活性材料教育部重點實驗室,天津300071
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