怎樣避免人elisa免疫檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失?

發(fā)布時(shí)間:2024-02-14
人elisa免疫檢測(cè)試劑盒操作步驟多,新手操作難免會(huì)有過失。而這些過失很多是由細(xì)節(jié)不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說(shuō)話,防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。當(dāng)然,大家還要學(xué)會(huì)自己發(fā)掘問題,找出原因。那么我們要怎樣完善elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失?
①:評(píng)估試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn),判定試劑符合要求后方可使用。
②:操作前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn),比如洗板次數(shù)的掌握等。
③:加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。另外,顯色的深淺及a值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露在外,尤其室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效。
④:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
⑤:使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
⑥:嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報(bào)陽(yáng)性,這可能是本底顯色的結(jié)果。
⑦:人elisa免疫檢測(cè)試劑盒洗滌*,洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。另外,洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。
⑧:嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),酶失活;反應(yīng)時(shí)間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
250 pyg broth base 用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng),使用時(shí)需加入氯化血紅素和*1(gb標(biāo)準(zhǔn)) pyg 液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)
250 trypticase soy-yeast extract broth 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)(sn、gb標(biāo)準(zhǔn)) 胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(tsb-ye)
10mg/支*5 每支添加于225ml hb4150、hb4192中(sn、gb標(biāo)準(zhǔn)) 萘啶酮酸
4.5mg*5 添加于225ml hb4160中制成lb1
4.0mg*5 添加于225ml hb4160中制成lb1
3.75mg/支*5 每支添加于225ml hb4150、hb4192中(sn、gb標(biāo)準(zhǔn)) 吖啶黃素
2.7mg*5 添加于225ml hb4160中制成lb1
5mg*5 添加于200ml hb4160中制成lb2
250 trypticase soy-yeast extract agar 用于單增李氏菌的分純,培養(yǎng),可用于做7%羊血瓊脂(sn標(biāo)準(zhǔn)) 胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(tsa-ye)
250 modified mcbride agar base 用于單增李氏菌選擇性分離(sn標(biāo)準(zhǔn)) 李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(mma)
3mg/支*5 每支添加于 100ml hb4155 *
250 bromcresol purple broth base 適用于微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),無(wú)菌加入各種糖醇類物質(zhì)(sn標(biāo)準(zhǔn)) 糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯
250 listeria enrichment broth base 添加奈啶酮酸,吖啶黃素,即為lb1,lb2,用于李氏菌二步增菌(gb標(biāo)準(zhǔn)) 李氏菌增菌肉湯(lb1,lb2)基礎(chǔ)
人elisa免疫檢測(cè)試劑盒
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