氨基柱正反相都可使用

發(fā)布時間:2025-03-14
氨基柱是指以硅膠作為基質(zhì)載體,鍵合氨基的色譜柱。氨基柱通常用于分析糖類化合物,所用流動相通常是甲醇、乙腈和緩沖鹽溶液,乙腈相對使用較多。氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的鍵合官能團氨丙基要比c18,c8柱的鍵合官能團c18,c8要容易水解,所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準備,特別是當你的使用條件是反相條件下時。
反相條件下使用時,要特別注意控制ph值范圍,ph值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當然也越有發(fā)生水解的危險。所以,在使用后以及準備長時間放置該柱時,必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。
有一種情況是,當使用氨基柱進行酸性物質(zhì)如果汁的分析時(分析其中的糖份),酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會使略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。這時,kromasil專家所給的建議是:
用5-10倍的柱體積的含0.5- 1.0%nh3的50-50乙
腈-水溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。
氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如luna氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。而我們做糖分析是用反相流動相,所以要先用異丙醇過渡。
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