氨基柱正反相都可使用

發(fā)布時(shí)間:2025-03-14
氨基柱是指以硅膠作為基質(zhì)載體,鍵合氨基的色譜柱。氨基柱通常用于分析糖類化合物,所用流動(dòng)相通常是甲醇、乙腈和緩沖鹽溶液,乙腈相對(duì)使用較多。氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比c18,c8柱的鍵合官能團(tuán)c18,c8要容易水解,所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準(zhǔn)備,特別是當(dāng)你的使用條件是反相條件下時(shí)。
反相條件下使用時(shí),要特別注意控制ph值范圍,ph值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。所以,在使用后以及準(zhǔn)備長時(shí)間放置該柱時(shí),必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。
有一種情況是,當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)如果汁的分析時(shí)(分析其中的糖份),酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。這時(shí),kromasil專家所給的建議是:
用5-10倍的柱體積的含0.5- 1.0%nh3的50-50乙
腈-水溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨),之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1%。
氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如luna氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。而我們做糖分析是用反相流動(dòng)相,所以要先用異丙醇過渡。
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