人甲狀腺素受體α1抗體(THRA1 Ab)ELSIA試劑盒使用說明書

發(fā)布時間:2024-08-01
人甲狀腺素受體α1抗體(thra1 ab)elsia試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96t
10ng/l-500ng/l
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中甲狀腺素受體α1抗體(thra1 ab)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人甲狀腺素受體α1抗體(thra1 ab)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入甲狀腺素受體α1抗體(thra1 ab),再與hrp標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過che底洗滌后加底物tmb顯色。tmb在hrp酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甲狀腺素受體α1抗體(thra1 ab)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(od值),通過標準曲線計算樣品中人甲狀腺素受體α1抗體(thra1 ab)濃度。
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含nan3的樣品,因nan3抑制辣根過氧化物酶的(hrp)活性。
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本od值大于標準品孔第一孔的od值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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