小鼠白介素4(il4)elisa試劑盒測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析
elisa即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法。engvall和perlmann于1971年先應(yīng)用該法進(jìn)行了igg定量測(cè)定，并命名為enzymelinkedimmunosorbentassay(elisa)。elisa的基本原理是：
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體)，而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性，又保留其酶活性；
③測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本(抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng)，再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例；再加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物，根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析，以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。
小鼠白介素4(il4)elisa試劑盒添加回收的幾種誤區(qū)：
呋喃類代謝物提取過程通常分三個(gè)關(guān)鍵步驟：
水解-----衍生化-----提取
(1)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的大標(biāo)準(zhǔn)濃度進(jìn)行添加回收。如德國(guó)拜發(fā)和我公司aoz試劑盒中的第6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)4.05ppb，amoz試劑盒中的第6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)8.1ppb。因?yàn)檫@些標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)過衍生化后的標(biāo)準(zhǔn)品，不能代表樣本前處理實(shí)驗(yàn)中的加酸水解和加衍生化試劑衍生這兩個(gè)步驟，所以就算回收率很高，但失去了實(shí)際參考價(jià)值。
(2)*依賴未衍生的代謝物標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行添加回收。因部分未衍生的代謝物在配制成標(biāo)準(zhǔn)品后有一定的有效期，會(huì)存在潛在的不穩(wěn)定因素，而且添加回收僅能考證衍生化和提取兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，不能驗(yàn)證從組織蛋白中水解呋喃類代謝物的過程，因此也有一定的局限性。
的評(píng)價(jià)方案：采用經(jīng)lc-ms-ms確證的陰陽(yáng)性樣品，留作質(zhì)控樣品，對(duì)檢測(cè)的樣本和試劑盒進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。這也是實(shí)驗(yàn)室所出數(shù)據(jù)可信度具說服力的關(guān)鍵點(diǎn)。
加樣
在小鼠白介素4(il4)elisa試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在leisa板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。
加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法elisa)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。
小鼠白介素4(il4)elisa試劑盒其他產(chǎn)品展示：人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(glut1)elisa試劑盒
人低密度脂蛋白(ldl)elisa試劑盒
人花生四烯酸(aa)elisa試劑盒
人骨涎蛋白(bsp)elisa試劑盒
人骨堿性磷酸酶(balp)elisa試劑盒
人*(ctx)elisa試劑盒
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-dpg)elisa試劑盒
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-ag)elisa試劑盒
人β羥丁酸(β-ohb)elisa試劑盒
人高密度脂蛋白*(hdl-c)elisa試劑盒
人n端中段骨鈣素(n-mid-ot)elisa試劑盒
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(lrp-6)elisa試劑盒
人極低密度脂蛋白受體(vldlr)elisa試劑盒
人低密度脂蛋白受體(ldlr)elisa試劑盒
人高密度脂蛋白(hdl)elisa試劑盒
人α*s轉(zhuǎn)移酶(α-gst)elisa試劑盒
人同型半*(hcy)elisa試劑盒
人游離脂肪酸(ffa)elisa試劑盒
人骨粘連蛋白(on)elisa試劑盒
人*(fa)elisa試劑盒
人內(nèi)毒素(et)elisa試劑盒
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( ppar-γ)elisa試劑盒
人*a(csa)elisa試劑盒
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(gfap)elisa試劑盒
人15脂加氧酶(15-lo/lox)elisa試劑盒
人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(cetp)elisa試劑盒
人白三烯c4(ltc4)elisa試劑盒
人*(cyt-c)elisa試劑盒
人脂蛋白脂酶(lpl)elisa試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶ii(gp-ii)elisa試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶mm(gp-mm)elisa試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶bb(gp-bb)elisa試劑盒
人脂蛋白α(lp-α)elisa試劑盒
人骨膠原交聯(lián)(cr)elisa試劑盒
人ⅰ型前膠原c末端肽(cⅰcp)elisa試劑盒
人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(dpd)elisa試劑盒
人吡啶交聯(lián)物(py)elisa試劑盒
人骨橋素(opn)elisa試劑盒
人γ氨基丁酸(gaba)elisa試劑盒
人p物質(zhì)受體(sp-r)elisa試劑盒
人環(huán)磷酸鳥苷(cgmp)elisa試劑盒
人脂蛋白磷脂酶a2(lp-pl-a2)elisa試劑盒