現(xiàn)在市場(chǎng)上的胎牛血清種類(lèi)繁多，特別是次剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人很難分辨血清質(zhì)量的好壞，下面上海滬鼎生物科技有限公司來(lái)告訴你血清的制作步驟和辨別方法。
制作動(dòng)物血清步驟：
1.采血：達(dá)到放血*，應(yīng)選擇前腔動(dòng)脈或靜脈放血，注意放血部位的消毒和器具的消毒。
2.析出血清：采用靜置自然析出方法，將析出的血清收集到經(jīng)消毒的生理鹽水瓶?jī)?nèi)，一般裝到生理鹽水瓶容量的三分之二，為了更*的分離血清，過(guò)夜后還會(huì)有血清析出，繼續(xù)收集。
3.殺滅病毒的處理：將收集好的血清，瓶口向上放入水浴鍋56℃水浴2小時(shí)，病毒經(jīng)高溫后失活，而在該溫度時(shí)，抗體效價(jià)不下降。
4.殺滅細(xì)菌，每毫升加2000單位的鏈霉素和2000單位的青霉素，充分搖均，封口即可使用。
5.存放，不立即使用時(shí)，應(yīng)冷凍保存。
辨別方法：
一、外觀(guān)
拿到血清，接觸的是血清外觀(guān)，對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō)，外觀(guān)的判斷尤為重要。
1.顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶(hù)采血后馬上離心收集，所以很少會(huì)有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當(dāng)然，國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)檎嬲奶ヅＱ迥δ懿?，紅細(xì)胞容易破裂。
2.沉淀
很多血清客戶(hù)，會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題，這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠(chǎng)家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清，大多來(lái)自北方，由于價(jià)格低廉，保存環(huán)境都不好，從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融，每次凍融過(guò)程，就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”，很少有沉淀產(chǎn)生。進(jìn)口的胎牛血清，過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著時(shí)間的推移，血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。當(dāng)然，進(jìn)口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁，甚至有大量沉淀。
3.澄清度
進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡，而國(guó)產(chǎn)血清，因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清，相對(duì)而言更加粘稠，顏色略深，這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷，但把兩者進(jìn)行對(duì)比，可容易分辨。
二、血源
市場(chǎng)上的血清血源主要分為中國(guó)、北美、南美和澳洲。
1.國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差，這是*的，主要原因并不是生產(chǎn)廠(chǎng)家的責(zé)任，而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用。國(guó)內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)重，同時(shí)飼養(yǎng)過(guò)程中抗生素極其濫用，有毒有害物質(zhì)會(huì)大量殘留在血清中，終不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。
2.南美血清，來(lái)源很多，如bioind的巴拿馬、gibco的烏拉圭、巴西等，這些血清由于采血的不可控性，質(zhì)量參差不齊，當(dāng)然，相對(duì)于國(guó)內(nèi)血清來(lái)說(shuō)好的多。另外，國(guó)內(nèi)銷(xiāo)售的南美血清大多顏色鮮紅，如bioind、gibco、hylone等品牌，但阿根廷的血清例外，這可能和各國(guó)的采血、生產(chǎn)工藝有關(guān)。
3.北美血清，主要來(lái)自美國(guó)和加拿大，如hclone的sh30396、sh30070、sh30071、gibco的16000-044、26140-079等。這類(lèi)血清，等級(jí)越高的顏色越淡，表現(xiàn)為淡黃中帶一點(diǎn)微紅，sh30070和sh30396對(duì)比就很明顯，特級(jí)胎牛血清基本就能進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)。北美血清還有一個(gè)顯著特點(diǎn)就是每瓶血清都能溯源，這對(duì)一些大型的疫苗廠(chǎng)、藥廠(chǎng)尤為重要。
4.澳洲血清，來(lái)源主要是新西蘭和澳大利亞，這是在北美血清禁運(yùn)之后進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)的，一般不具有溯源功能，由于生產(chǎn)、運(yùn)輸?shù)仍?，價(jià)格相對(duì)來(lái)說(shuō)比較貴。拿gibco的10099和16000相比較，后者質(zhì)量等級(jí)更高，顏色更淡，性?xún)r(jià)比更高。
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