斑馬魚尾鰭細胞細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備rpmi-1640培養(yǎng)基(rpmi-1640：gibco，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%dmso，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1ml細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4ml培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000rpm條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1ml培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000rpm，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
重組小鼠 m-csf / csf-1 蛋白
重組大鼠 gm-csf / csf2 蛋白 (fc 標簽)
重組大鼠 gm-csf / csf2 蛋白 (his 標簽)
重組小鼠 gm-csf / csf2 蛋白 (his 標簽)
重組小鼠 gm-csf / csf2 蛋白 (fc 標簽)
重組小鼠 m-csf / csf-1 蛋白 (his 標簽)
重組人 gm-csf / csf2 蛋白 (his 標簽)
重組人 / 食蟹猴 m-csf / csf-1 蛋白 (his 標簽)
重組人 g-csf / csf3 蛋白 (isoform b)
重組人 g-csfr / cd114 / csf3r 蛋白 (fc 標簽)
重組人 g-csf / csf3 蛋白 (fc 標簽)
重組人 gm-csf / csf2 蛋白 (fc 標簽)
重組人 ephrin-a4 / efna4 蛋白 (fc 標簽)
重組狗 ephrin-b2 / efnb2 蛋白 (fc 標簽)
重組人 ephrin-b2 / efnb2 蛋白
重組狗 ephrin-b2 / efnb2 蛋白 (his 標簽)
重組狗 ephrin-a5 / efna5 蛋白 (fc 標簽)
重組斑馬魚 efnb2a / ephrin b2a 蛋白 (his 標簽)
重組斑馬魚 efnb2a / ephrin b2a 蛋白 (fc 標簽)
重組大鼠 ephrin-b3 / efnb3 蛋白 (fc 標簽)
重組大鼠 ephrin-b3 / efnb3 蛋白 (his 標簽)
重組食蟹猴 ephrin-a5 / efna5 蛋白 (his 標簽)
重組大鼠 ephrin-a1 / efna1 蛋白 (his 標簽)
重組大鼠 ephrin-b1 / efnb1 蛋白 (fc 標簽)