著絲粒蛋白抗體zw10的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：
1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/l碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/l硼酸緩沖液充分透析；
2.所用的nhsb及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件；
3.用nhsb量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 triton x-100, tween20等；
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；
6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用；
8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。
血管緊張素ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體
膜粘連蛋白2受體抗體
血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體
拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體
α-1抗胰糜蛋白酶抗體
α-1抗胰蛋白酶抗體
atp結(jié)合蛋白家族6抗體
三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族g1抗體
脂聯(lián)素受體2抗體
angel1蛋白抗體
angel2蛋白抗體
ankle2蛋白抗體
特異性錨樣蛋白1抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13b抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20a1抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20a3抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體
氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)atp合成酶6g抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體
芳香基硫酸酯酶k抗體
神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體
錨定蛋白g抗體
肌動(dòng)蛋白α/α-sma/α actin抗體