茶葉有效成分抽提純化技術(shù)特點(diǎn)
茶葉有效成分抽提純化技術(shù)根據(jù)其目的不同而分為兩個(gè)方面:
一是針對(duì)有效成分定性及結(jié)構(gòu)分析而采用的抽提純化技術(shù)(純度);另一方面是針對(duì)純粹性提取制備較高純度某有效物質(zhì)為目的(得率)。前者強(qiáng)調(diào)有效成分的純度,后者強(qiáng)調(diào)某有效成分的得率。
第一,茶樹(shù)部位不同其有效成分含量是不同的,環(huán)境條件及品種的不同其含量差別亦大。如果要分離純化茶葉復(fù)合多糖,選用粗老茶原料就比細(xì)嫩茶原料好。分離純化多酚類(lèi)物質(zhì),則采用大葉中嫩幼茶葉原料,其得率遠(yuǎn)比小葉中粗老茶原料高得多。從茶葉中抽提茶黃素或茶紅素必須選用紅茶,最好選用大葉種的紅碎茶。
第二,許多具有生物活性的化合物一旦改變了它們存在的環(huán)境,很容易變形而喪失其生物活性。如在抽提純化復(fù)合多糖時(shí),如果溶劑的酸堿度掌握不好,使其復(fù)合多糖較長(zhǎng)時(shí)間處在過(guò)酸或過(guò)堿溶劑中,不僅會(huì)影響抽提純化得率,而且常常使多糖鏈的糖苷鍵水解而喪失其活性。又如茶多酚抽提純化時(shí),尤其是在干燥過(guò)程中要避免與氧氣接觸,溫度也不能過(guò)高,否則,在有氧和較高溫度情況下極易氧化破壞。
第三,茶葉有效成分的抽提純化幾乎都在溶液中進(jìn)行,溶液的溫度、ph值、離子強(qiáng)度等各種參數(shù)對(duì)溶液中各成分的綜合影響常常是無(wú)法固定的。如茶葉復(fù)合多糖的組成,有的認(rèn)為是由葡萄糖、阿拉伯糖和核酸組成;有的則認(rèn)為是由葡萄糖、阿拉伯糖、核糖、聚木糖、烯酮糖以及聚葡萄糖等所組成。對(duì)于像抽提得率、分子組成等數(shù)據(jù)的確定,要從茶葉原料、抽提純化方法直至各種環(huán)境條件、使用的試劑藥品等級(jí)等都必須嚴(yán)格地加以規(guī)定說(shuō)明。
第四,茶葉中有效成分的抽提純化過(guò)程常常少則幾個(gè)步驟,多則十幾個(gè)步驟,并要不斷變換各種分離方法,才能達(dá)到抽提較高純度的產(chǎn)品。但如果各種步驟先后使用不當(dāng),不僅影響得率,而且也影響其生物活性。因此,在抽提純化時(shí)多采取溫和的“多階式“進(jìn)行步驟,也就是我們常說(shuō)得的“逐層剝皮“方法。
第五,抽提純化所得到的有效成分的純度監(jiān)測(cè)與化學(xué)上純度概念并不完全相同。只憑一種方法所得到的純度結(jié)論往往是片面的,實(shí)質(zhì)是錯(cuò)誤的。例如多酚類(lèi),它是由多種成分組成的一類(lèi)物質(zhì),不僅各組分的生物活性不同,而且對(duì)環(huán)境條件的敏感性亦大為不同,在用經(jīng)典的aoac法分析其純度時(shí),就存在酯型兒茶素易被京膠沉淀出去,而非酯型兒茶素不易出去的現(xiàn)象,從而影響分析結(jié)果。與此同時(shí),采用什么標(biāo)樣作標(biāo)準(zhǔn)對(duì)分析結(jié)果影響亦很大。同樣用國(guó)標(biāo)法——酒石酸鐵比色法測(cè)定茶多酚純度也存在同樣問(wèn)題。用此方法分析純度較高的多酚類(lèi)物質(zhì)時(shí),常常出現(xiàn)純度大于100%的現(xiàn)象。最好的方法是在一批產(chǎn)品中取樣,用hplc分析其組成,按此組成用純品的兒茶素混合作標(biāo)樣作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),才能得出較為準(zhǔn)確的結(jié)果。