[目的]為快速和準(zhǔn)確地對(duì)鷓鴣茶種質(zhì)材料進(jìn)行issr分析提供有效引物。[方法]基因組dna的提取采用改良的ctab法：先用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)dna完整性,eb染色,以lambda dna/hindⅲ＋eco rimarkers為參照,電泳結(jié)果用gel doc xr型凝膠成像分析系統(tǒng)下照相并記錄。再用biophotometer紫外分光光度計(jì)分別測(cè)定od_（260）和od_（280）,并計(jì)算出od_（260）/od_（280）值,每份樣品的od_（260）/od_（280）比值均要求在1.8～2.0范圍內(nèi)。測(cè)定每份樣品dna濃度（ng/μl）,并將其稀釋至20 ng/μl,分裝后置-20℃保存。利用99個(gè)issr引物,對(duì)來自海南島境內(nèi)的10個(gè)居群中共20份鷓鴣茶種質(zhì)材料進(jìn)行pcr擴(kuò)增,以篩選出適合于所有鷓鴣茶種質(zhì)材料issr分析的有效引物。[結(jié)果]從99個(gè)供試引物中共篩選出15個(gè)多態(tài)性豐富、條帶清晰且可重復(fù)性良好的有效引物。用篩選出的15個(gè)引物對(duì)66份鷓鴣茶種質(zhì)材料進(jìn)行issr-pcr擴(kuò)增,均可獲得帶型豐富和清晰可辨的dna指紋圖譜;15個(gè)引物共擴(kuò)增出286條dna譜帶,其中231條為多態(tài)性帶,占總擴(kuò)增帶數(shù)的80.77%,平均每個(gè)引物擴(kuò)增出19.1條譜帶。[結(jié)論]所篩選的15條引物可以有效地應(yīng)用于鷓鴣茶種質(zhì)資源材料的issr分析。完成機(jī)構(gòu)：[1]海南大學(xué)熱帶生物資源教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,海南?？?70228 [2]海南大學(xué)苦丁茶研究所,海南?？?70228