核酸和蛋白質(zhì)是生物大分子,為生命的zui基本物質(zhì)之一。他們在生物的生長、發(fā)育、繁殖、遺傳和變異等生命活動中占有極其重要的地位。隨著分子生物學的廣泛應用,核酸定量已經(jīng)成為一種常規(guī)化的實驗手段。
目前核酸蛋白定量的方法以吸光度測定為主:其原理是測量od(260)和od(280)的吸收值——核酸的zui高吸收峰為260nm,蛋白質(zhì)的zui高吸收峰為280nm。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數(shù), 1od的吸光值分別相當于50μg/ml的dsdna,37μg/ml的ssdna,40μg/ml的rna,30μg/ml的寡核苷酸。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應的樣品濃度。核酸定量中a260/a280的比值代表樣品的純度,純凈的樣品比值大于1.8(dna)或者2.0(rna)。如果小于1.8或者2.0,說明存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
通常實驗室測量樣品吸光度的方法:用比色杯測定的分光光度計及超微量分光光度計等。biotek公司推出了快速高通量的超微量核酸蛋白定量新方法:應用take3超微量檢測板。take3 使用靈活,可以用于全光譜的吸收光讀數(shù),廣泛覆蓋了吸收光檢測的各項應用。配合酶標儀使用一次可以同時檢測16個或48個體積為2μl的微量樣品,而無需稀釋。并且利用biotek光程校準的技術,保證了優(yōu)異的準確性和性。
對比傳統(tǒng)比色杯方法:take3檢測板節(jié)約了樣品的浪費,上樣量僅為2ul,對于檢測珍貴樣品的用戶特別有用,并且操作方便簡單無需稀釋操作。對比超微量分光光度計:高通量快速檢測是take3的zui大特點。并且take3檢測板光譜應用廣泛:200~999nm,1nm步進。對于需要進行高通量快速微量核酸蛋白樣品定量的用戶來說,take3的應用是個簡便的核酸蛋白定量檢測新方法。biotek酶標儀配上一塊小小的take3,就能變?yōu)橐惶准喾N檢測任務于一身的工作平臺。