毛細(xì)管電泳四色熒光檢測法分析茶樹ssr標(biāo)記

發(fā)布時間:2024-02-18
將毛細(xì)管電泳四色熒光檢測技術(shù)應(yīng)用于茶樹ssr標(biāo)記分析.該方法采用三引物pcr擴(kuò)增ssr位點,三引物即在5’端加有m13尾巴序列(5’-cacgacgttgtaaaacgac-3’)的特異正向引物、特異反向引物及帶有熒光標(biāo)記的通用型m13引物:為了運用四色熒光檢測系統(tǒng)使通過一次毛細(xì)管電泳能同時檢測3個以上的ssr位點.采用藍(lán)、綠、黑3種不同顏色的熒光染料分別對3個m13引一物進(jìn)行標(biāo)記.應(yīng)用該方法對42個茶樹品種(系)的16個ssr位點進(jìn)行遺傳分析的結(jié)果表明:此法具有簡便、可靠、低成本及高通量的優(yōu)點;且隨著所分析ssr位點數(shù)的增加,降低成本的效果更加顯著.采用建立的方法,還篩選獲得了11個多態(tài)性豐富的可應(yīng)用于茶樹遺傳研究的ssr標(biāo)記.完成機(jī)構(gòu):[1]湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)教育部重點實驗室,中國湖南長沙410128 [2]湖南省茶業(yè)有限公司,中國湖南長沙410005
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