摘要：本文研究了40份茶樹(shù)資源春、夏、秋三季茶樹(shù)新梢egcg的含量變化，結(jié)果表明，40份資源egcg年含量平均為6.88%，三季茶樹(shù)eccg平均含量夏>春>秋；含量變化最大的是秋梢，變異系數(shù)為0.27。同時(shí)獲得3份資源：22號(hào)(10.07%)、31號(hào)( 10.020lo)、39號(hào)(10.11%)，egcg三季平均含量超過(guò)10%。
關(guān)鍵詞：茶樹(shù)資源；季節(jié)；eccg
茶葉中含有豐富的茶多酚，其含量高達(dá)茶葉干重的20%—33%，包括兒茶素類(lèi)、黃酮及黃酮苷、花青素類(lèi)及酚酸化合物等幾大類(lèi)。茶多酚的主要成分是兒茶素，兒茶素又可分為非酯型兒茶素（簡(jiǎn)單兒茶素）和酯型兒茶素（復(fù)雜兒茶素）。其中酯型兒茶素所占比例最大，為茶多酚總量的55%左右，其含量為茶葉干重的12%—l9%，包括egcg、ecg、gcg等組分。egcg為酯型兒茶素，近年來(lái)大量科學(xué)研究表明，egcg是綠茶的主要活性成分，具有多種功效，在抑菌、抗病毒、預(yù)防心血管疾病、抗痛、防輻射、延緩衰老等方面有著不可替代的重要作用。茶葉是天然egcg的唯一來(lái)源，且egcg在茶樹(shù)體內(nèi)的分布存在較大差異，其中以嫩梢中含量最高川。茶樹(shù)為多年生植物，且呈現(xiàn)季節(jié)輪次性生長(zhǎng)，不同的生長(zhǎng)季節(jié)，其代謝特征有較大差異，本文主要考察了不同季節(jié)茶樹(shù)嫩梢中egcg的含量差異，茲將分析結(jié)果報(bào)道如下。
1 材料與方法
1.1材料
在石門(mén)茶區(qū)（含東山峰）選擇40份資源，采摘一芽二葉，采用蒸青法固定樣品，統(tǒng)一測(cè)定egcg含量。
1.2儀器和化學(xué)藥品
lc-4a高效液相色譜儀（日本島津）、rf-530檢測(cè)器、isc -07na型分離柱、prr -2蠕動(dòng)泵、c-r3a數(shù)據(jù)處理機(jī)、艾科浦分析型實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)（重慶頤洋企業(yè)發(fā)展有限公司）、ab204 -s電子天平、dk-s26型電熱恒溫水浴鍋（上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、高速電動(dòng)植物粉碎機(jī)（江蘇銀河平衡儀器廠）、電子天平（德國(guó)產(chǎn)）：bs2000s，d=0.0001g、鋁盒：內(nèi)徑4—5cm，高3~4cm，具蓋。
化學(xué)藥品：甲酰胺（色譜純），甲醇（分析純），冰醋酸（分析純）。
1.3方法
1.3.1含水率測(cè)定(103±20℃)
將鋁盒洗凈，編號(hào)，烘干至恒重，記下重量。用四分法取粉碎碎茶樣，稱取10.00g，置于鋁盒中，再用電子天平( d=0.0001g)稱重，置于烘箱內(nèi)，去蓋，斜置于盒邊，在103±2℃烘箱內(nèi)烘4h，加蓋取出，在干燥器內(nèi)冷卻至室溫后，稱重。在103±2℃烘箱內(nèi)再烘60min，再稱重。直至連續(xù)兩次稱重之差不超過(guò)0.005g，即為恒重。依烘干前后的重量之差，計(jì)算茶樣含水率。
1.3.2試樣制備
磨樣→過(guò)篩→稱重0.50g置于50ml三角瓶中→加入30%乙醇40ml→置于水浴鍋微沸30min←過(guò)濾到looml容量瓶→冷卻定容→用微量注射器取loul→色譜檢測(cè)。
1.3.3 色譜分析
進(jìn)樣量：10ul；固定相：shim-pack，ods c185llm，4.6 x150mm，柱溫380c；流動(dòng)相：a水，b甲酰胺：甲醇：冰醋酸=40:2:1.5；流速：1.1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：278nm。
洗脫梯度見(jiàn)下表
2結(jié)果與分析
據(jù)報(bào)道，不同茶樹(shù)品種，其新梢egcg含量差異很大，介于6%—11%(占鮮葉干物重的百分率)，即品種間差異可達(dá)l倍左右。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明（表2、表3）：在40份資源中，大多數(shù)新梢egcg含量介于6%~10%，春梢、夏梢、秋梢分別占72.5%、85.0%、47.5%；而高于10%者，春梢、夏梢、秋梢分別占2.5%、7.5%、0；低于6%的春梢、夏梢、秋梢分別占10%、25.5%、52.5%。表3中極差顯示，品種間egcg含量變化差異較大，三季的極差均大于6%，如39號(hào)夏梢egcg含量高達(dá)10.57%，16號(hào)為5.66%，9號(hào)僅4.460/0。40個(gè)品種或株系春梢egcg含量變化范圍為2.99%—10.31%，平均6.69%，即最高或最低含量相差2.4倍多，變異系數(shù)為0.23。夏梢egcg含量的范圍為4.46%—10.570/0，平均7.61%，即最高和最低相差1.4倍，變異系數(shù)為0.18。秋梢egcg含量范圍為3.280/0—9.890/0，平均6.07010，即最高和最低相差2.0倍，變異系數(shù)為0.27。
茶樹(shù)新梢egcg含量需要處于什么水平，才可視為高egcg的特異資源，目前尚未見(jiàn)有該方面的報(bào)道，據(jù)我國(guó)兩次茶樹(shù)種質(zhì)資源篩選的資料表明：茶多酚含量高于34%者，視為超常規(guī)水平的品種或株系。egcg含量一般占茶多酚總量的40%，以此為依據(jù)，則egcg高于13%者，即可視為超常規(guī)水平的品種或株系。本試驗(yàn)結(jié)果表明（表2）：在40份資源中，egcg含量春、夏、秋三季平均值超過(guò)130/0者未有發(fā)現(xiàn)。有3份資源超過(guò)10010，分別為22號(hào)(10.06%)、31號(hào)( 10.02%)、39號(hào)(10.14%)，這3份高egcg資源，對(duì)開(kāi)發(fā)利用egcg有重要價(jià)值。
3討論
茶樹(shù)中含有豐富的多酚類(lèi)化合物（簡(jiǎn)稱茶多酚），其含量高達(dá)鮮葉干物重的20%～35%，其中egcg（epigallocatechin-3 -gallate，表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯）所占比例最大，為茶多酚總量的40%左右，其含量高達(dá)鮮葉干物重的8%~14%。在茶樹(shù)體內(nèi)主要是由（一）一表沒(méi)食子兒茶素和沒(méi)食子酸經(jīng)酯化作用形成，其關(guān)鍵性的調(diào)節(jié)酶受光溫等外界條件調(diào)控，從而表現(xiàn)出季節(jié)性含量的差異。此外，茶樹(shù)新梢的不同伸育程度，egcg變化顯著，隨伸育程度增長(zhǎng)含量漸次降低。本研究中，egcg含量表現(xiàn)夏>春>秋的趨勢(shì)，一是夏季光照強(qiáng)，氣溫高，茶樹(shù)光合作用強(qiáng)，碳代謝旺盛，多酚類(lèi)形成總量比春秋兩季多，所以egcg含量為三季中含量最高，在茶葉品質(zhì)上，表現(xiàn)為澀味重，與楊賢強(qiáng)等的研究結(jié)果一致。春季與秋季比較，春季含量要高于秋季，可能是由于采摘相同的一芽二葉原料，秋季原料由于溫度、光照、水分的環(huán)境因素影響，其木質(zhì)化程度要高于春季。
不同品種的茶樹(shù)，其egcg含量也是有差異的，主要是由于控制酶基因的差異所致。egcg的生物合成，從種子萌發(fā)開(kāi)始，首先合成l-ec與d，l-c等非酯型兒茶素，再經(jīng)羥基化或者沒(méi)食子?；纬傻年帯Ｒ虼?，不同的品種其羥基化、沒(méi)食子?；瘡?qiáng)度有很大差異。云南大葉種含有較多的簡(jiǎn)單兒茶素l-ec、d，l-c，認(rèn)為是其保持了原始特性。那么egcg含量高的品種，可能是由于茶樹(shù)應(yīng)對(duì)外界環(huán)境變化而進(jìn)化的結(jié)果，從而也表現(xiàn)出本研究中40份資源egcg的含量各異。