假單胞菌的氯兒茶酚1,2-雙加氧酶基因的克隆和表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2024-02-04
從土壤中分離得到1株降解2,4-二氯酚(2,4-dcp)能力較強(qiáng)的細(xì)菌菌株gt24l-1,克隆了該菌株的3,5-二氯兒茶酚1,2-雙加氧酶基因(dcpb),采用的克隆策略為:用southem雜交對dcpb進(jìn)行定位后,構(gòu)建重組質(zhì)粒,再用斑點(diǎn)雜交從重組質(zhì)粒中篩選目的轉(zhuǎn)化子.經(jīng)序列測定得知dcpb亞克隆片段全長4303bp,其中dcpb基因編碼區(qū)765bp.核苷酸和推測的氨基酸序列分析表明,dcpb與已在genbank登記的相關(guān)基因有一定的差異.dcpb基因能夠在大腸桿菌轉(zhuǎn)化子中成功地表達(dá)有生物活性的酶.完成機(jī)構(gòu):[1]南京師范大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院,江蘇南京210097 [2]浙江大學(xué)生物系統(tǒng)工程與食品科學(xué)學(xué)院,浙江杭州310029 [3]華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,湖北武漢430070 [4]浙江大學(xué)環(huán)境與資源學(xué)院,浙江杭州310029
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