生物制藥微課堂｜宿主細(xì)胞殘留蛋白分析，如何獲得更佳結(jié)果？
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lcms分析方法越來越多的用于宿主細(xì)胞殘留蛋白（hcp）的分析，hcp分析的難點見往期微信稿“生物制藥微課堂|第二期-宿主細(xì)胞殘留蛋白如何分析？”。如何獲得優(yōu)秀的基于lc-ms的hcp分析結(jié)果? 答案將在本期分享的兩場關(guān)于hcp的lcms分析的網(wǎng)絡(luò)講座，每場都有詳細(xì)的樣品前處理，lcms方法和數(shù)據(jù)處理的詳細(xì)介紹，可謂干貨滿滿，供有需求的老師參考。
webinar 1:
data visualizations for routine host cell protein analysis by lcms
講師介紹
博士：
andrew williamson
賽默飛生物制藥銷售專家
andrew williamson博士是賽默飛生物制藥銷售專家。在此之前，andrew在賽默飛公司擔(dān)任蛋白質(zhì)組學(xué)專家，此前他在曼徹斯特大學(xué)克里斯蒂醫(yī)院的蛋白質(zhì)組學(xué)實驗室工作并管理該實驗室。在此期間，安德魯從事了許多基于腫瘤項目的蛋白質(zhì)組學(xué)分析，研究zhi療的關(guān)鍵指標(biāo)和生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)。在此期間，andrew還與合作者合作分析了多種干細(xì)胞和癌癥樣本，包括小鼠、人和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。
講師介紹
博士：
michelle english
protein metrics inc.
的成功科學(xué)家
michelle english 博士是protein metrics inc.的客戶成功科學(xué)家，在該公司，她專注于幫助客戶使用質(zhì)譜對早期和后期產(chǎn)品表征。在加入protein metrics公司之前，michelle是輝瑞公司的一名科學(xué)家，并在弗吉尼亞大學(xué)的hunt實驗室工作。
看點：
hcp的完整解決方案及可視化的數(shù)據(jù)展示
生物藥生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生產(chǎn)品不需要的宿主細(xì)胞殘留蛋白(hcp)，大部分hcp可以通過純化去除。監(jiān)管指南規(guī)定在上市前必須確定生物藥中殘留的hcp水平。lc-ms技術(shù)在過去幾年中得到了快速發(fā)展，但迄今為止該技術(shù)對分析人員專業(yè)技能要求高和需要對數(shù)據(jù)進(jìn)行手工分析。分析挑戰(zhàn)包括樣品寬動態(tài)范圍，極低的hcp豐度，差的序列覆蓋率，等等。此外，假陽性和假陰性一樣危險，會造成不能重現(xiàn)，這也阻礙了lc-ms成為常規(guī)的hcp分析手段。
講座關(guān)鍵點：
01.為什么lc-ms在生物藥分析中越來越常用
02.如何對非質(zhì)譜專家用戶有效的展示數(shù)據(jù)
03.如何更快提供可信的結(jié)果
該報告詳細(xì)介紹了樣品前處理方法、lc-ms方法和數(shù)據(jù)處理。非變性smart digest酶解能去除大部分主成分，提高h(yuǎn)cp鑒定的數(shù)目。高靈敏度和采集速度快的orbitrap exploris 480 質(zhì)譜儀進(jìn)一步提高h(yuǎn)cp鑒定數(shù)目，并且重現(xiàn)性好。軟件proteome discoverer和protein metrics用于數(shù)據(jù)的分析，得到可視化好的hcp鑒定和相對定量的結(jié)果和報告。
流程化的數(shù)據(jù)處理
（點擊查看大圖）
webinar 2:
a data-independent acquisition (dia) library based approach for host cell protein analysis on the thermo scientific orbitrap platform
講師介紹
博士：
ian anderson
賽默飛生物制藥銷售專家
ian anderson博士在allergan工作了6年多，專注于從抗體到基因zhi療載體等多種生物制藥產(chǎn)品的質(zhì)譜鑒定。在此之前，他在sgs-m-scan工作，開發(fā)用于表征生物藥品和生物仿制藥的新型質(zhì)譜方法。
看點：
基于dia采集模式的hcp分析
現(xiàn)在用于hcp分析方法，絕大部分用的是數(shù)據(jù)依賴性采集（dda）的方法。數(shù)據(jù)非依賴性采集（dia）與dda相比，不丟失任何信息、靈敏度更高，適合用于hcp分析。該報告講解了基于thermo scientific orbitrap fusion lumos三合一質(zhì)譜儀和orbitrap exploris 480質(zhì)譜儀開發(fā)hcp的dia方法，以及如何在兩個質(zhì)譜系統(tǒng)設(shè)置合適參數(shù)。該報告將詳細(xì)介紹好的hcp數(shù)據(jù)庫如何建立以及構(gòu)建該庫的zui佳方式，并列舉了如何在生物制藥過程開發(fā)中使用該方法的例子。
講座關(guān)鍵點：
01.討論基于高分辨質(zhì)譜平臺的hcp分析方法
02.演示使用dia方法進(jìn)行hcp的分析
03.該方法在生物制藥開發(fā)過程中應(yīng)用
dia分析lcms平臺
本報告詳細(xì)介紹了dia采集模式用于hcp分析的方法建立。dda是好的建立譜圖庫的數(shù)據(jù)采集模式，數(shù)據(jù)不丟失、高靈敏度的dia采集的數(shù)據(jù)可以檢索該譜圖庫從而得到可信的hcp鑒定結(jié)果。本報告對dda和dia的質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置進(jìn)行了詳細(xì)的解讀，且該方法可以在orbitrap fusion lumos三合一質(zhì)譜儀和orbitrap exploris 480質(zhì)譜儀相互轉(zhuǎn)移，表明該方法的穩(wěn)健性好、重復(fù)性好。
dia 用于hcp分析的實驗流程
（點擊查看大圖）
使用orbitrap高分辨質(zhì)譜平臺exploris 480和orbitrap fusion lumos，能夠?qū)崿F(xiàn)鑒定靈敏度及動態(tài)范圍的進(jìn)一步提高。那么如何進(jìn)行合理的實驗設(shè)計？質(zhì)譜方法的參數(shù)設(shè)置？鑒定結(jié)果可做到什么程度？這些問題都會在以上報告中給出答案，精彩不要錯過！
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