nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）試劑盒商品貨號：qs1003
英文名稱：nadp-malate dehydrogenase（nad-mdh）assay kit
別名：nadp-蘋果酸脫氫酶試劑盒 nadp-mdh kit nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）試劑盒 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測試盒
檢測方法：常量法
商品貨號：商品品牌：規(guī)格基本售價選擇規(guī)格
qs1003-50管/48樣 50管/48樣 ￥320.00元
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
測定意義：
mdh （ec 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中mdh是tca循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中mdh催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，mdh在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，mdh分為nad-依賴的mdh和nadp-依賴的mdh， nadp-mdh主要存在于真核細(xì)胞中。
測定原理：
nadp-mdh催化nadph還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
產(chǎn)品說明書
貨號: qs1003 規(guī)格：50 管/48 樣
nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）試劑盒說明書 紫外分光光度法
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
mdh （ec 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中 mdh 是 tca 循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中 mdh 催化草酰乙酸形成蘋果酸。 草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，mdh 在細(xì)胞多種生理活動中 扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病 性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，mdh 分為 nad-依賴的 mdh 和 nadp-依賴的 mdh， nadp-mdh 主 要存在于真核細(xì)胞中。
測定原理：
nadp-mdh 催化 nadph 還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致 340nm 處光吸收下降。
自備實驗用品及儀器：
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 ml 石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一: 提取液 60 ml×1 瓶，在 4℃保存；
試劑二: 液體 50 ml×1 瓶，在 4℃保存；
試劑三: 粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 300μ l 蒸餾水；用不完的試劑分裝后-20℃ 保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四: 粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 300μ l 蒸餾水；用不完的試劑分裝后-20℃ 保存，禁止反復(fù)凍融。
樣本測定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個）：試劑一體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 試劑一），超 聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200w，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃ 離心 10min，取上清置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1ml 試劑一），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、將試劑二在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。
3、操作表：
試劑名稱（μ l） 測定孔
樣本 20
試劑二 760
試劑三 10
試劑四 10
將上述試劑按順序加入 1 ml 石英比色皿中，混勻后立即在 340 nm 波長下記錄初始吸光度 a1 和反應(yīng) 1min 后的吸光度 a2，計算 δ a=a1-a2。
注意：若 a1-a2 大于 0.5，需將樣本用提取液稀釋，使 a1-a2 小于 0.5，可提高檢測靈敏度。 計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
nadp-mdh 活力單位的計算：
1、血清（漿）nadp-mdh 活力的計算
單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘消耗 1 nmol 的 nadph 定義為一個酶活力單位。
nadp-mdh（nmol/min/ml）=[δa×v 反總÷（ε ×d）×109 ]÷v 樣÷t=6430×δa
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 nadp-mdh 活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 nadph 定義為一個酶活力單位。
nadp-mdh （ nmol/min/mg prot ） =[δa×v 反 總 ÷ （ ε ×d ） ×109 ]÷(v 樣 ×cpr) ÷t=6430×δa÷cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 nadph 定義為一個酶活力單位。
nadp-mdh（nmol/min/g 鮮重）=[δa×v 反總÷（ε ×d）×109 ]÷（w ×v 樣÷v 樣總）÷t =6430×δa÷w
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 nadph 定義為一個酶活力單位。
nadp-mdh（nmol/min/104 cell）=[δa×v 反總÷（ε ×d）×109 ]÷（v 樣÷v 樣總×500） ÷t=12.86×δa
v 反總：反應(yīng)體系總體積，8×10-4 l；ε：nadph 摩爾消光系數(shù)，6.22×103 l / mol /cm；d： 比色皿光徑，1cm；v 樣：加入樣本體積，0.02 ml；v 樣總：加入提取液體積，1 ml；t：反應(yīng) 時間，1 min；w：樣本質(zhì)量，g；cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬。
系列產(chǎn)品及單價
輔酶ⅰ系列
qs1000 輔酶ⅰnad(h)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 500
ms1000 輔酶ⅰnad(h)含量測試盒 微量法 100管/48樣 920
qs1001 乳酸脫氫酶（ldh）測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 170
ms1001 乳酸脫氫酶（ldh）測試盒 微量法 100管/48樣 330
qs1002 nad-蘋果酸脫氫酶（nad-mdh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 280
ms1002 nad-蘋果酸脫氫酶（nad-mdh）測試盒 微量法 100管/96樣 550
qs1003 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 320
ms1003 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測試盒 微量法 100管/96樣 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）測試盒 微量法 100管/96樣 850
qs1005-50 檸檬酸合酶(cs）測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 3200
qs1005-25 檸檬酸合酶(cs）測試盒 可見分光光度法 25管/24樣 2000
ms1005 檸檬酸合酶(cs）測試盒 微量法 100管/48樣 3500
qs1006 丙酮酸脫羧酶（pdc）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 720
ms1006 丙酮酸脫羧酶（pdc）測試盒 微量法 100管/96樣 1400
qs1007 醇脫氫酶（adh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 280
ms1007 醇脫氫酶（adh）測試盒 微量法 100管/96樣 550
qs1008 單脫氫抗壞血酸還原酶（mdhar）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 800
ms1008 單脫氫抗壞血酸還原酶（mdhar）測試盒 微量法 100管/96樣 1550
qs1009 乙醛脫氫酶（aldh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 420
ms1009 乙醛脫氫酶（aldh）測試盒 微量法 100管/96樣 800
qs1010 nad激酶（nadk）測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 600
ms1010 nad激酶（nadk）測試盒 微量法 100管/48樣 1100
qs1011 線粒體呼吸鏈復(fù)合體ⅰ/nadh-輔酶q還原酶測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣 1280
ms1011 線粒體呼吸鏈復(fù)合體ⅰ/nadh-輔酶q還原酶測試盒 微量法 100管/96樣 2500
產(chǎn)品說明書