聲波聚焦流式細(xì)胞儀
聲波聚焦流式細(xì)胞儀可以使用超聲波更好地將細(xì)胞聚焦于一條直線,進(jìn)行激光照射。即使在較高的進(jìn)樣速度下,聲波聚焦技術(shù)也可以精確地將細(xì)胞定位在液流的中心,因此細(xì)胞信號的變異系數(shù)較小,數(shù)據(jù)質(zhì)量更高。作為對比,同樣在高進(jìn)樣速度下,傳統(tǒng)的流體動力學(xué)聚焦由于鞘液壓力相對變小,樣本流的中心部分變寬,導(dǎo)致信號變異系數(shù)增大、數(shù)據(jù)質(zhì)量下降。此外,聲波聚焦的方式允許更高的上樣量,并能夠減少樣品堵塞。聲波聚焦流式細(xì)胞儀可以利用多達(dá)4種激光和14個熒光通道對樣本進(jìn)行檢測。
細(xì)胞分選儀
細(xì)胞分選儀是傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀中的一種特殊類型,它允許用戶根據(jù)所需參數(shù),選擇特定的細(xì)胞群或顆粒群,然后將這些細(xì)胞或顆粒引導(dǎo)到收集容器中,以供進(jìn)一步研究。
細(xì)胞分選儀對樣品液流進(jìn)行高頻振蕩,以產(chǎn)生液滴來分離細(xì)胞。然后,液滴被賦予正電荷或負(fù)電荷,并通過金屬偏轉(zhuǎn)板,在那里它們根據(jù)電荷被導(dǎo)向一個特定的收集容器。收集容器可以是管狀、載玻片或板狀(96孔或384孔較為常見)。
細(xì)胞分選儀有兩種類型,石英比色皿型和噴氣管型,它們的不同之處在于激光照射點(diǎn)的位置。石英比色皿型細(xì)胞分選儀具有固定的激光照射線路,更容易為分選做好準(zhǔn)備。噴氣管型細(xì)胞分選儀需要每天對激光照射線路進(jìn)行校準(zhǔn),設(shè)置起來更困難,但更適合小顆粒檢測。
成像細(xì)胞儀
成像流式細(xì)胞儀(ifc)結(jié)合了傳統(tǒng)的流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡系統(tǒng),這允許在單細(xì)胞和群體細(xì)胞水平上快速分析樣品的形態(tài)和多參數(shù)熒光。ifc可以像共聚焦顯微鏡或熒光顯微鏡那樣跟蹤單個細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分布,也可以像流式細(xì)胞儀那樣處理大量細(xì)胞。它們在多種應(yīng)用中發(fā)揮關(guān)鍵作用,如細(xì)胞信號傳導(dǎo)、共定位研究、細(xì)胞間相互作用、dna損傷和修復(fù),以及需要對大量細(xì)胞的細(xì)胞定位與熒光表達(dá)進(jìn)行協(xié)調(diào)的應(yīng)用。
質(zhì)譜流式細(xì)胞儀
質(zhì)譜流式細(xì)胞儀結(jié)合了飛行時間質(zhì)譜儀和流式細(xì)胞儀的功能。使用這種儀器時,細(xì)胞用重金屬離子標(biāo)記抗體進(jìn)行標(biāo)記,而不是熒光標(biāo)記抗體,并使用時間飛行質(zhì)譜法進(jìn)行檢測。但質(zhì)譜流式細(xì)胞儀不具備fsc 或 ssc 光檢測功能,因此無法使用常規(guī)方法檢測細(xì)胞聚集體。此外,質(zhì)譜流式細(xì)胞術(shù)不具有細(xì)胞自身熒光信號,試劑不具有與熒光標(biāo)記相關(guān)的發(fā)射光譜重疊,因此不需要補(bǔ)償。然而,樣品在分析過程中會被破壞,因此無法進(jìn)行細(xì)胞分選,并且采集速率遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)流式細(xì)胞儀。
用于微珠陣列分析的細(xì)胞儀
多重微珠陣列在分析小體積樣品中的大量分析物方面已變得流行。簡單地說,這些檢測利用在特定通道中具有已知熒光量的捕獲珠和由單獨(dú)的激光檢測到的報告分子,來量化與特定珠相關(guān)的捕獲分析物的數(shù)量。
光譜分析儀
多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)的挑戰(zhàn)之一是熒光色素之間的補(bǔ)償(或消除光譜重疊)。一種新型的流式細(xì)胞儀,光譜分析儀就是專門針對這一問題而設(shè)計(jì)的。光譜分析儀測量多色樣品中每個熒光色素的整個熒光發(fā)射光譜,以創(chuàng)建光譜指紋。然后在分析過程中,每個光譜是未混合的,為每個熒光色素提供一個純信號。光譜分析正逐漸取代傳統(tǒng)的pmts作為高維流式細(xì)胞術(shù)的檢測方法。