mapk/erk激酶激酶15抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(nai)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺t( chloramine t)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把na125i和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/l磷酸鈉緩沖液,ph7.5;無載體的na125i3.7gbq/ml(100mci/ml)的naoh液;100g/l三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺t的0.5mol/l磷酸鈉緩沖液(ph7.5);胺t反應(yīng)終止緩沖液;
(三)操作要點
1.用胺t法進行化,也可在大約ph7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫酸熒光素(fitc)偶聯(lián))胺t量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
adcy2腺苷酸環(huán)化酶2抗體
apoc3載脂蛋白c3抗體
apolipoprotein e4載脂蛋白e4抗體
ambra1自噬相關(guān)基因ambra1抗體
phospho-atg4c(ser177)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4c抗體
phospho-atg4c(ser398)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4c抗體
phospho-ask1 (ser966)磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-atxn1 (ser775)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體
atxn1/ataxin-1脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
phospho-amyloid precursor protein (thr668)磷酸化app淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-ask1 (ser967)磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-ask1 (thr845)磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-atf2 (thr69/71)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-atp1a1 (tyr10)磷酸化鈉鉀atp酶蛋白a1抗體
phospho-atp1a1 (ser16)磷酸化鈉鉀atp酶蛋白a1抗體
acetyl coa carboxylase乙酰輔酶a羧化酶抗體
phospho-acetyl coenzyme a carboxylase alpha (ser78)磷酸化乙酰輔酶a羧化酶抗體
phospho-ack1 (tyr859 + 860)磷酸化ack1抗體
phospho-ampk alpha-1(ser485+ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
phospho-ampk beta 1 (ser108)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
phospho-alk (tyr1604)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
phospho-atm(ser1981)磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體