3) 上樣 將樣品加入到固相萃取柱并迫使樣品溶液通過固定相，使分析物和一些樣本干擾物保留在固定相上。為了保留分析物，溶解樣品的溶劑必須較弱。如果太強，分析物將不被保留，結(jié)果回收率將會很低，這一現(xiàn)象叫穿漏（breakthrough）。盡可能使用弱的樣品溶劑，可以使溶質(zhì)得到zui強的保留或者說窄的譜帶。只要不出現(xiàn)穿漏，允許采用大體積的上樣量（0.5～1l）。 有時候固定樣品必須用一個很強的溶劑進行萃取，這樣的萃取液是不能直接上樣的。所以萃取液要用一個弱溶劑稀釋，
以得到一個合適的溶劑總強度進行上樣。例如一個土壤樣品采用50%甲醇萃取，得到2 ml萃取液，用8 ml水稀釋，得到10%的甲醇溶液，這樣就可以直接上反相固相萃取柱而不存在穿漏問題。