常見的DNA純化方法

發(fā)布時間:2024-07-24
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,提純dna樣本是十分常見的步驟,下面給大家介紹幾種常見的dna純化方法,一起來看看吧!一、苯酚-氯仿抽提法
苯酚和氯仿是常見的有機(jī)溶劑,一般可以用來將蛋白雜質(zhì)從dna樣本里去除?;驹硎?,有機(jī)溶劑會使雜質(zhì)蛋白變性,并將雜質(zhì)蛋白留在有機(jī)溶劑層,而dna分子是有水溶性的,所以會進(jìn)入水溶液層。這樣dna和雜質(zhì)蛋白就被分開了。這個方法的好處是便宜有效,特別是在提取基因組dna時,要去掉許多從細(xì)胞裂解液中帶來的蛋白,苯酚法十分好用但苯酚和氯仿是有毒溶劑,而且有可能會殘留在提純過后的dna樣本中,對后續(xù)反應(yīng)造成影響。
二、乙醇沉降法
乙醇沉降法其實(shí)就是一種鹽析方法。鹽陽離子(一般是na+、醋酸鈉鹽)和70%的乙醇加入到dna樣本中后,陽離子與帶負(fù)電的dna骨架相互作用,從水分子那里將dna搶奪出來,而乙醇改變了dna的結(jié)構(gòu),使得dna聚合最終沉降。
三、磁珠吸附法
原理是在攜帶正電的磁珠和dna分子特定結(jié)合后,磁珠被固定在磁極上,dna樣本中的其他雜質(zhì)在此時被移除,而后使用高ph的洗出液使得磁珠帶負(fù)電,因此dna分子又會脫離磁珠,被洗出。
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