大鼠elisa檢測試劑盒檢測的原理方法

發(fā)布時(shí)間:2024-07-03
大鼠elisa檢測試劑盒檢測原理:
大鼠elisa檢測試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被大鼠活性氧(ros)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、hrp標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物tmb顯色,tmb在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠活性氧(ros)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(od值),計(jì)算樣品濃度。
大鼠elisa檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿:edta、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按大鼠elisa檢測試劑盒一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠elisa檢測試劑盒操作注意事項(xiàng):
1.大鼠elisa檢測試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μl加樣即可。
4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
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