t細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中非常重要的組成部分。為了研究這些細(xì)胞和它們的功能,我們需要一種專門的培養(yǎng)基。以下是t細(xì)胞培養(yǎng)基的使用方法:
1、準(zhǔn)備工作:
(1)從質(zhì)量上都得到驗(yàn)證的供應(yīng)商獲得所需的培養(yǎng)基。
(2)消毒容器和各種儀器,并準(zhǔn)備無菌操作環(huán)境。
(3)制備試劑和培養(yǎng)物,例如血清、l-谷氨酸和丙酮酸鈉等。
2、步驟:
(1)打開冰箱取出,并讓其緩慢升溫至室溫。
(2)然后用潔凈的牛奶蓋在容器口上,并利用80%乙醇消毒外層表面。
(3)裝載所需的培養(yǎng)物進(jìn)容器中,除此以外需要注意的是,如果不是購買了直接可以使用的tm(t-cellmedium)試劑,就還需要加入適量的熒光素亮乳液作為指示劑,以便于觀察到是否有細(xì)菌或真菌污染。
(4)前往實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)箱,并在其中放置所需的t細(xì)胞。
(5)使用無菌技術(shù),保護(hù)gelvital濾膜,用20ml至50ml的tm向平板中加入過早凝固并且陳制了一個(gè)晚上的l-谷氨酸亮。當(dāng)?shù)撞磕毯螅趖m中分配0.2到1.5×10^7細(xì)胞,將細(xì)胞均勻地覆蓋于內(nèi)部表面,在對于某些需要錨定下來的細(xì)胞類型或是根據(jù)試驗(yàn)需要,添加必要的小分子試劑。
(6)檢查溫度、水份以及二氧化碳等因素是否恰當(dāng),記得每一天更換培養(yǎng)物。
3、注意事項(xiàng):
(1)手套和口罩必須佩戴,以確保操作的無菌性。
(2)一定要避免任何污染,包括空氣中的灰塵、細(xì)菌和真菌等,否則可能會導(dǎo)致培養(yǎng)物的失效。
(3)如果發(fā)現(xiàn)污染,請立即停止使用相關(guān)培養(yǎng)物,并采取必要的措施消毒相關(guān)容器和設(shè)備。
(4)制作好的t細(xì)胞培養(yǎng)基,可以在4°c下保存,但是我們建議您在兩個(gè)月內(nèi)使用完。
t細(xì)胞培養(yǎng)基的使用方法非常重要,其關(guān)系到t細(xì)胞的生長和發(fā)育。為了確保實(shí)驗(yàn)有效,需要遵循正確的步驟和注意事項(xiàng),并且需要定期更換培養(yǎng)物以保證t細(xì)胞的健康生長。