摘要 在照光和黑暗條件下研究了不同濃度的6-ba和ga+6-ba混合劑處理對油茶離體葉片衰老的影響.結果表明，在光條件下6-ba可以保持葉片細胞的超氧歧化酶(sod)活性(為對照的129%)，降低了膜脂過氧化產物丙二醛(mda)的積累(為對照的47%)，延緩葉綠素和蛋白質的降解.說明6-ba有延緩葉片衰老的作用，在黑暗條件下上述生理指標的水平較低，表明光對6-ba的作用有一定的增益效應.ga+6-ba混合劑處理沒有明顯效果.
關鍵詞 6-芐氨基嘌呤；油茶葉片；延緩衰老
中圖分類號 s794.401
delayed action of 6-ba on detached-leaves
senescence in camellia oleifera
hu zhesen
resources ＆ environment department，fujian college of forestry，nanping，fujian 353001
abstract experiments were carried out to study the effect of different concentration 6-ba solutions and 6-ba-ga mixtures on detached-leaves senescence of camellia oleifera under illumination and dark，the results indicated that:under illumination，6-ba could maitain the activity of sod，reduce the accumulation of chlorophyll and protein，therefore，6-ba played delayed action on leaves senescence of camellia oleifera，the delayed acton of 6-ba on leaves senescence under dark tallied with that under illumination，but the degrees were lower.the 6-ba-ga mixture hardly had evident effect on senescence.
key words camellia oleifera，leaf，6-benzyladenine，senescence
促進油茶產量提高是林業(yè)工作者的緊迫任務，除了采取集約經營的一系列措施外，還必須努力探索其生長發(fā)育的內在生理生化機制.油茶葉片是積累干物質的源泉，如果能延緩葉片的衰老將會有效地增加產量.衰老被認為是一種氧化過程，是功能的衰退，是體內自由基累積導致膜脂脂質過氧化的結果〔1〕.離體葉片衰老容易調控，試驗周期短.因此采取6-ba、ga等處理油茶離體葉片，然后測定與葉片衰老相關的超氧歧化酶(sod)活性，過氧化作用產物丙二醛(mda)含量、葉綠素和蛋白質含量等生理指標.為延緩油茶生長后期葉片衰老過程達到增產目的提供理論依據.
1 材料與方法
1.1 材料的處理
取枝梢下部2～3片成熟葉片為材料，鉆取面積約為1.2cm2圓片，分別漂浮于1mg/l6-ba、5mg/l6-ba 溶液、6-ba+ga 混合液(各為2.5mg/l)和水中.每個處理取70～80個小圓片，各項處理分別光和暗兩種條件下進行，室溫25℃～27℃放置8天，每種處理重復3次.
1.2 生理生化指標測定
1.2.1 葉綠素含量測定 按arnnan的方法取處理的圓葉片用95%乙醇研磨提取，濾液用721分光光度計測定光密度值，計算含量〔2〕.
1.2.2 蛋白質含量測定 取處理的圓葉片加0.2mol／l磷酸緩沖液(ph6.0)研磨勻漿，離心取上清液加入考馬斯亮蘭溶液于721分光光度計595nm波長處測光密度值，計算含量〔3〕.
1.2.3 sod活性測定 將處理的圓葉片沖洗干凈吸干后于4℃下加入0.05mol／l磷酸緩沖液(ph7.8)研磨勻漿，10000r／min離心20min，上清液用721分光光度計測定光密度值，計算酶活性，以抑制氮蘭四唑光化還原50%為一個酶單位〔4〕.
1.2.4 mda含量測定 取處理的圓葉加蒸餾水研磨勻漿，在提取液中加入0.5%硫代巴比妥酸溶液沸水浴中煮沸10min，3000r／min 離心15min，取上清液測532nm和600nm處的光密度，計算過氧化脂質含量〔5〕.
1、2、3、4—光處理 1′、2′、3′、4′—暗處理
1，1′—對照2，2′—5mg／l6-ba 3，3′—1mg／l6-ba
4，4′—6-ba+ga(各2.5mg／l)
附圖 不同濃度6-ba處理對油茶葉片各生理指標的影響
figure effect of 6-ba with different concentrations on the
physiological indexes of camellia oleifera leaves
2 試驗結果
2.1 6-ba對油茶葉片葉綠素含量的影響
光照條件下5mg／l和1mg／l6-ba處理的油茶葉片的葉綠素含量分別為對照的115%和133%(經方差分析呈顯著差異)，暗條件下上述兩種濃度的6-ba處理的葉片葉綠素含量分別為對照的106%和114%(附圖).說明6-ba處理能維持較高的葉綠素含量，5mg／l6-ba處理的效果更佳，而且光照條件下有增益效應.
2.2 6-ba對油茶葉片蛋白質含量的影響
經過6-ba處理的油茶葉片蛋白質含量比對照的增加較多(附圖).光照條件下以5mg／l和1mg／l6-ba處理的葉片蛋白質含量分別相當于對照的154%和120%.暗條件下上述兩種濃度的6-ba處理的葉片蛋白質含量分別相當于對照的139%和118%.說明6-ba能有效地延緩葉片中蛋白質的降解從而延緩葉片衰老.也可以看出ga+6-ba混合液處理的葉片蛋白質含量與對照的無顯著差異.
2.3 6-ba對油茶葉片sod活性的影響
光照條件下以5mg／l和1mg／l6-ba處理的葉片sod活性分別比對照的高29%和20%.暗條件下經上述兩種濃度6-ba處理的葉片sod活性分別比對照的高18%和13%.說明6-ba能維持葉片sod活性較高水平，有效地防止葉片衰老.ga+6-ba混合液處理的葉片sod活性與對照的也無明顯差異(附圖).
2.4 6-ba對油茶葉片mda含量的影響
光照條件下經5mg／l和1mg／l6-ba處理的葉片mda含量分別比對照的低27%和14%.暗條件下經上述兩種濃度6-ba處理的葉片mda含量分別比對照的低的22%和11%.說明6-ba能抑制油茶葉片的膜脂過氧化作用.ga+6-ba混合液處理的葉片mda含量與對照的也無明顯差異(附圖).
3 結論與討論
油茶葉片的光合色素、可溶性蛋白質含量、可以清除活性氧危害的sod活性的降低和由于膜脂過氧化作用加強mda含量增加而導致葉片衰老.以6-ba處理葉片可以明顯影響這些生理過程.mda的積累比對照少，sod活性維持在較高水平，明顯加強了細胞內清除自由基的能力，抑制膜脂的過氧化作用.dhindsa等也發(fā)現(xiàn)激動素對燕麥葉片片段有防止mda增加的作用〔6〕.可見細胞分裂素是通過影響蛋白質、類脂、色素等一系列代謝過程延緩葉片衰老的，以6-ba+ga混合液處理葉片對其生理過程無明顯影響.
本試驗結果，6-ba溶液的光照條件下處理葉片比暗條件下處理具有比較顯著的效果.說明光對激素的作用有增益效應.表明以6-ba和ga等調節(jié)葉片衰老過程的效果可能因外界條件的差異而有所不同.
加入外源細胞分裂素可以延緩油茶葉片的衰老，延長光合器官的功能增加干物質，因此在林業(yè)生產實踐上也具有參考價值.
*福建省教委科學基金資助項目
作者簡介：胡哲森，男，1950年10月出生，副教授。
作者單位：福建林學院資源與環(huán)境系 南平353001
參考文獻
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2 華東師范大學生物系植物生理教研室主編.植物生理學實驗指導.北京：人民教育出版社，1980.68～166
3 李琳等.應用蛋白染色劑考馬斯蘭g—250測定蛋白質的方法.植物生理學通訊，1980，(6)：52～55
4 黃學林等編.種子生理實驗手冊.北京：農業(yè)出版社，1990.127～130
5 朱廣廉等編.植物生理學實驗.北京：北京大學出版社1990.245～248
6 dhindsa r s，plumb-dhindsa p l and d m reis.leaf senescence and lipid peroxidation:effect of some phytohormones and scarengers of free redicals and singler oxygen.plant physiol，1982，56:453～457