在運(yùn)用羊elisa試劑盒測(cè)定抗體方面，通常所用的方法稱為間接法，也是目前常用的方法。其原理：間接法首先用抗原包被于固相載體，這些包被的抗原必須是可溶性的，或者至少是微小的顆粒，經(jīng)洗滌，加入含有被測(cè)抗體之標(biāo)本，再經(jīng)孵育洗滌后，加入酶標(biāo)記抗抗體，(對(duì)人的標(biāo)本來(lái)說(shuō)即加酶標(biāo)抗人球蛋白igg、igm)，再經(jīng)孵育洗滌后，加底物顯色,底物降解的量，即為欲測(cè)抗體的量，其結(jié)果可用目測(cè)或用分光光度計(jì)定量測(cè)定。
今天咱們來(lái)聊聊會(huì)影響羊elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素：
1、操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18c～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，是否符合要求。
2、顯色液量不可過(guò)多加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過(guò)多，以免顯色過(guò)強(qiáng)。
3、手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孑l內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑l間竄流，造成孔問(wèn)污染，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4、要保證加液量一致，在使用時(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯(cuò)誤。
5、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。
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關(guān)鍵詞：分光光度計(jì)