配制細(xì)胞培養(yǎng)基（cell culture medium）時(shí)，常使用胎牛血清（fetal bovine serum，fbs）作為關(guān)鍵成分之一，因?yàn)樗胸S富的生長(zhǎng)因子、蛋白質(zhì)和養(yǎng)分，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖非常有益。以下是配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)使用胎牛血清的一般步驟：
材料準(zhǔn)備：
適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)（例如，dmem，rpmi-1640，mem等）。
胎牛血清（fbs）。
雙抗溶液（選加）
步驟：
消毒操作： 在無菌工作臺(tái)下，確保所有用具和試劑都是無菌的，以防止細(xì)胞培養(yǎng)的污染。
血清選擇： 決定所需的fbs濃度。通常，fbs的最終濃度在培養(yǎng)基中約為5%至10%。要注意，不同類型的細(xì)胞可能需要不同的fbs濃度。一些特殊細(xì)胞培養(yǎng)可能需要更低的fbs濃度。
配制培養(yǎng)基： 將血清用三步法解凍，根據(jù)您所選擇的基礎(chǔ)培養(yǎng)基的要求，將fbs添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。通常，將fbs添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基的體積比例為5%至10%。
添加補(bǔ)充物： 根據(jù)您培養(yǎng)的細(xì)胞類型，可能需要添加額外的補(bǔ)充物，如非必要氨基酸、維生素、雙抗溶液等。確保按照相關(guān)實(shí)驗(yàn)室方案或文獻(xiàn)中的建議添加這些成分。
混勻： 使輕柔混勻，確保fbs和其他成分均勻分散在培養(yǎng)基中。
保存： 將培養(yǎng)基存儲(chǔ)在4°c的冰箱中，避免陽光直射，以延長(zhǎng)其保存時(shí)間，盡量在1周內(nèi)用完。
請(qǐng)注意，不同類型的細(xì)胞可能需要不同的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件，因此在開始實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)仔細(xì)了解您正在培養(yǎng)的特定細(xì)胞類型的培養(yǎng)需求，并根據(jù)需要進(jìn)行定制化的培養(yǎng)基配制。此外，細(xì)胞培養(yǎng)過程中的無菌操作非常重要，以防止細(xì)胞培養(yǎng)的污染。