酒曲中含有大量的微生物，其中有霉菌、酵母和細菌，在液體中，酵母生長比霉菌快，而酸性培養(yǎng)基酵母比細菌生長更適宜。因此，利用這一特性，可先將酒曲中的霉菌與細菌數(shù)目減少，甚至消除(生理純化法)，然后用平板法分離酵母。此法較為簡單。
1．配制培養(yǎng)基
(1)酸性蔗糖豆芽汁(加乳酸0.5%)培養(yǎng)液分裝試管，滅菌。
(2)蔗糖豆芽汁瓊脂，分裝試管和三角瓶，滅菌。
2．分離
(1)用滅菌過的小刀，割開曲塊，挖其中米粒大小1塊投入酸性培養(yǎng)液中，搖動后將該管置于25℃恒溫培養(yǎng)箱(上海凱朗儀器設備廠試驗箱、培養(yǎng)箱、干燥箱)中培養(yǎng)，兩天后轉到另一管酸性培養(yǎng)液中，見到霉菌絲球即行剔除。然后每隔兩日轉接一次，一周后分離。
(2)zui后將轉接試管酸性培養(yǎng)液中的酵母直接用稀釋平板法進行分離，培養(yǎng)后，分別移植單獨的酵母菌落于蔗糖豆芽汁斜面上，貼上標簽，標明菌株編號以及移植日期，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待長出、分純后即可進行鑒定。