乳腺癌細胞凋亡水平上升時，包括 mir?145?5p 在內(nèi)的多種 mirna 水平上升 。mir?145?5p 與 atf1 和乳腺癌細胞凋亡之間的聯(lián)系，本研究旨在探討 mir?145?5p 靶向調(diào)控 atf1對乳腺癌細胞 mcf7 凋亡的影響。胎 牛 血 清（thermo 公司）、1640 培養(yǎng)基（ge 公司）、pmir?rb?report 質(zhì)粒（上海欽誠）、hiperfect transfection reagent（德國凱杰），p21、bax、atf1、bcl?2、caspase9、tubulin抗體（英國 abcam），蛋白裂解液（碧云天）、山羊抗大鼠 igg 和山羊抗兔 igg（h+l）（艾美捷）、pbs（上海生工）、蛋白酶抑制劑（上海睿鉑賽）、青* 混 合 液（上 海 索 寶）、clonexpress ii one stepcloning 試劑盒（南京諾唯贊），luciferase 熒光素酶報告檢測試劑盒（武漢艾美捷），u6 和 mir?145?5p熒光定量 pcr 引物、qpcr 和 mirna 反轉錄試劑盒（廣 州 復 能 基 因），mirna 快 速 提 取 試 劑 盒（haigene）、western blot 裝置（美國伯樂公司），細胞培養(yǎng)箱、生物安全柜購和酶標儀（美國 thermo）、微量加樣器（法國 gilson）、冷凍離心機（德國 ep?pendorf）、旋轉搖床（江蘇海門市其林貝爾）、脫色搖床（大龍興創(chuàng)）、熒光定量 pcr 儀（美國 abi）；mir?145?5p 序列來自 mirbase，mir?145?5p 模似物和 mir?145?5p 抑制物由上海生工生物工程股份有限公司合成。
mirna 是 內(nèi) 源 性 22nt 非 編 碼 rna，其 靶 向mrna 用于切割或翻譯抑制。許多 mirna 調(diào)節(jié)程序性細胞死亡，包括細胞凋亡、自噬和壞死性凋亡。一系列研究表明，mir?145?5p 是幾種腫瘤的腫瘤抑制因子，如結腸癌 、乳腺癌、和前列腺癌 ，而 mir?145?5p 抑制乳腺癌的機制尚未報道。atf1 是構成基本*拉鏈轉錄因子的亞家族的一員，介導各種細胞外信號的轉錄反應，它參與細胞活力和細胞轉化 。