核酸作為一切分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ),而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素之一。在開(kāi)發(fā)核酸提取試劑時(shí),除了常規(guī)的化學(xué)成分,一些小分子核酸或酶類可以很大程度提高提取效率或去除非目的物質(zhì)干擾,成為核酸提取中的重要組分。
核酸沉淀的輔助物質(zhì)
carrier rna01carrier rna概念及作用
carrier rna,中文名載體rna,又叫核酸助沉劑。在核酸提取環(huán)節(jié),提取使用到的離心管壁多是聚丙烯的材料,管壁上有靜電,會(huì)吸附核酸。在提取純化過(guò)程中采用carrier rna 可幫助核酸去除靜電效應(yīng),保證核酸能很好被吸附到純化柱上,提高洗脫效率,從而達(dá)到盡可能多的回收樣本中核酸!
02carrier rna常見(jiàn)類型
作為核酸沉淀的輔助物質(zhì),carrier rna有多種類型,polya鉀鹽、大腸桿菌總rna、酵母總rna、trna等;
03carrier rna常見(jiàn)問(wèn)題
carrier rna室溫放置一段時(shí)間還能用嗎?carrier rna出現(xiàn)降解影響使用嗎?carrier rna影響下游實(shí)驗(yàn)嗎?
carrier rna是溶解在rna保護(hù)劑中的,液體carrier rna在37℃或室溫下短期內(nèi)(7天內(nèi))放置影響不大;carrier rna本質(zhì)上是500 nt~1000 nt范圍內(nèi)的片段,稍微降解不影響正常使用;對(duì)于下游應(yīng)用為熒光定量pcr,carrier rna對(duì)ct值無(wú)影響,對(duì)于下游應(yīng)用為ngs,可根據(jù)實(shí)際需求添加。
04產(chǎn)品介紹
翌圣生物carrier rna是酵母來(lái)源的rna,無(wú)dnase、rnase酶殘留,蛋白和dna殘留含量極低??捎糜诓《竞怂崽崛 ⑽⒘縟na提取等實(shí)驗(yàn),提取的核酸可用于后續(xù)rt-pcr,rt-qpcr等實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品分為液體和凍干型粉末制劑,便于直接使用和長(zhǎng)距離運(yùn)輸、保存。
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
carrier rna, 6 μg/μl
19701es
1 ml / 5 ml / 100 ml
-25~-15℃保存,有效期2年
carrier rna powder, 216 μg/tube
19703es
1 tube / 100 tube / 1000 tube
室溫保存,有效期2年
carrier rna powder, 310 μg/tube
19704es
1 tube / 100 tube / 1000 tube
室溫保存,有效期2年
線性化丙烯酰胺溶液
01線性化丙烯酰胺溶液的概念和作用
線性丙烯酰胺,英文名稱linear acrylamide(linear polyacrylamide,簡(jiǎn)稱lpa),是一種共沉淀劑,有助于核酸純化過(guò)程中核酸的沉淀。
02線性化丙烯酰胺溶液的特點(diǎn)
是一種中性載體,且非生物性來(lái)源,因此,不含潛在的核酸或核酸酶污染;
不會(huì)干擾a260/a280讀數(shù)、且不會(huì)抑制聚合酶以及限制性內(nèi)切酶活性;
兼容于其他后續(xù)分子生物學(xué)應(yīng)用,如pcr,酶切消化等;
助沉皮克級(jí)別以上的 dna 和 rna (包括 oligo)可回收片段長(zhǎng)度在 20nt 以上,單鏈雙鏈核酸均可。
03產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
linear acrylamide solution(5 mg/ml)
19701es
1 ml
4℃保存,有效期3年。
核酸提取輔助酶
rnase a
01rnase a的概念和作用
核糖核酸酶a(ribonuclease a,rnase a),作為一種核糖核酸內(nèi)切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈rna上的胞嘧啶(c)或尿嘧啶(u)殘基。核糖核酸酶a(rnase a)最常見(jiàn)的應(yīng)用在于質(zhì)粒dna或基因組dna制備過(guò)程中去除rna,另外,本品還可用于rna酶保護(hù)分析、rna序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
02rnase a的特點(diǎn)
rnase a來(lái)源于bovine pancreas,無(wú)內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶污染,無(wú)需預(yù)先加熱,可直接使用,耐高溫環(huán)境。
03產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
rnase a(100 mg/ml)
10406es
1 ml
產(chǎn)品-20℃保存,有效期2年。
rnase a(10 mg/ml)
10405es
1ml
-20℃保存,有效期1年
ribonuclease a(rnase a),from bovine pancreas
10407es
100mg/1g
-20℃干燥保存,有效期2年
deoxyribonuclease i(dnase i)
01dnase i的概念和作用
脫氧核糖核酸酶i(dnase i),即deoxyribonuclease i,一種發(fā)現(xiàn)于多種細(xì)胞和組織的核酸內(nèi)切酶,靶向切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生5’端為磷酸基團(tuán)、3’端為羥基的多聚核苷酸,平均消化產(chǎn)物最小為多聚四核苷酸。dnase可催化多種形式dna,如單鏈dna、雙鏈dna,甚至染色質(zhì)(其切割速率受組蛋白影響)。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用于清除蛋白中的dna,或者用于向dna中引入缺口使標(biāo)記堿基插入dna。
02dnase i的特點(diǎn)
dnase i的最佳的工作范圍是ph7-8,且活性依賴于ca2+,并可被二價(jià)金屬離子如co2+,mn2+,zn2+等激活。5 mm ca2+可保護(hù)酶使其不被水解。在mg2+存在下,該酶可隨機(jī)識(shí)別和切斷dna任一條鏈上的任意位點(diǎn);而在mn2+存在的條件下,可同時(shí)識(shí)別dna的兩條鏈并在幾乎相同的位點(diǎn)進(jìn)行切割。
03產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
deoxyribonuclease i(dnase i) from bovine pancreas
10607es
15 ku/10×15ku
-20℃保存,有效期2年
deoxyribonuclease i(dnase i) from bovine pancreas
10608es
25 mg/100mg/1g
-20℃保存,有效期2年
蛋白酶k
01蛋白酶k的概念和作用
proteinase k(蛋白酶 k)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對(duì)分子量約為 29.3 kda,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。proteinase k 應(yīng)用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體 dna,蛋白質(zhì)印跡以及去除 dna 和 rna制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn),而變性劑如 sds(1 %)可提高其活性。
02蛋白酶k的特點(diǎn)
源于基因重組酵母菌株;
不含 rnase 和 dnase;
在尿素和 sds 中活性穩(wěn)定存在;
在較廣的 ph 范圍內(nèi)(ph 4.0– 12.0)均有活性,最佳 ph 范圍為 ph 7.5 - 9.0;
03產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
proteinase k蛋白酶k
10401es
100mg/1g/5 g/100g
4℃保存,有效期 3 年。
proteinase k solution蛋白酶k溶液(20 mg/ml)
10412es
1ml/10ml/25ml/500ml
4℃保存,有效期2年。
rna穩(wěn)定劑
動(dòng)植物組織rna穩(wěn)定液
01動(dòng)植物組織rna穩(wěn)定液的作用
rna酶廣泛存在環(huán)境中,很容易降解新鮮采取的動(dòng)植物組織、血液、體液等樣本中的rna。rnasafe動(dòng)植物組織穩(wěn)定液(rnasafe tissue stabilizer)是專門(mén)開(kāi)發(fā)用于穩(wěn)定并保護(hù)采集樣本內(nèi)rna,作為一種無(wú)毒溶液,可迅速滲入組織,滅活內(nèi)源rnase。
02動(dòng)植物組織rna穩(wěn)定液的特點(diǎn)
操作極其簡(jiǎn)便:只需要將新鮮組織切成合適大小(≤0.5 cm)的組織塊,浸入5~10倍體積的rnasafe中即可。
穩(wěn)定周期長(zhǎng):經(jīng)rnasafe浸潤(rùn)的組織/細(xì)胞可在37℃保存1天,室溫保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃長(zhǎng)期保存。
下游兼容性廣:幾乎兼容于所有的rna分離方法,如hiefftm total rna extraction reagent(貨號(hào):10606es60),以及幾乎所有的商業(yè)化rna抽提試劑盒,包括離心柱抽提法,磁珠純化法等。
材料應(yīng)用性廣:可用于多種動(dòng)植物組織(如腦、心臟、肝臟、胰臟、腎臟、脾臟、睪丸、肌肉、植物的莖葉等)的保存,還可用于酵母、組織培養(yǎng)細(xì)胞等。
03產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
rnasafetissuestabilizerrnasafe
10604es60
100 ml
室溫保存,有效期5年。
相關(guān)產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
保存條件和效期
lysozyme溶菌酶
10402es
5/50g
-20℃保存,有效期3年
lyticase (10?u/μl) 溶壁酶
10403es
1500/3000/10000 u
-20℃保存
snailase 蝸牛酶
10404es
5/10g
2-8℃保存,有效期2年
rnasafe-ice冰凍動(dòng)植物組織rna穩(wěn)定-過(guò)渡溶液
10605es
100 ml
室溫保存,有效期2年