[目的]為建立油茶rapd分析的最佳反應(yīng)體系。[方法]分別用改良sds法和ctab法從12個油茶品種的新鮮幼葉中提取基因組dna。通過測定od260和od280來比較兩種方法提取dna的純度。建立油茶的rapd反應(yīng)程序,通過優(yōu)化反應(yīng)條件獲得油茶rapd分析的最佳反應(yīng)體系。[結(jié)果]ctab法提取的油茶基因組dna純度高于sds法。油茶rapd分析的最佳反應(yīng)體系為:1.0utaqdna聚合酶、1.5mmol/lmgcl2、200p.mol/ldntp、10pmol/l隨機(jī)引物、20ngdna模板、2μl10×pcr buffer,加重蒸水至20出。油茶的rapd反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性3min;94℃變性1min,40℃退火1min,72℃延伸2min,40循環(huán);72℃延伸7min。[結(jié)論]該研究所用dna純度較高,反應(yīng)條件控制嚴(yán)格,試驗(yàn)中擴(kuò)增穩(wěn)定性較好,是適合油茶rapd分析的最佳反應(yīng)體系。完成機(jī)構(gòu):南昌理工學(xué)院生環(huán)系,江西南昌330013