馬血清的使用方法及注意事項(xiàng)

發(fā)布時(shí)間:2024-04-04
馬血清采用健康的馬血液為原料,封閉系統(tǒng)內(nèi)無菌采血,微孔過濾而成。性狀為淺黃色澄清液體,無細(xì)菌、真菌、支原體等,馬血清比胎牛血清具有更高的蛋白質(zhì)和更少的微量金屬,在某些應(yīng)用中可以作為胎牛血清的替代品,是醫(yī)院、科研院校、動(dòng)物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。使用方法:
血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀),置于2℃~8℃中使之融化,解凍過程中間歇地輕輕搖晃均勻,待全部溶解后再分裝或直接使用。*融解的血清從4℃拿出,按要求比例(5%-20%)加基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置成*培養(yǎng)基,建議其置于4℃冰箱存放并于1-2周內(nèi)用完。
適用范圍:
1.10%的馬血清能維持對綿羊紅血球(srbc)的抗體反應(yīng)。
2.馬血清常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)使用,可以作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充劑,已被用作嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞和視網(wǎng)膜細(xì)胞等培養(yǎng)的補(bǔ)充劑。
3.適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制、診斷試驗(yàn)、作為支原體生長和試驗(yàn)培養(yǎng)基的補(bǔ)充,以及用于培養(yǎng)造血干細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞。
注意事項(xiàng):
血清沉淀的物質(zhì)主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),脂蛋白,冷凝集素,玻連蛋白,胎球蛋白,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀),膽固醇等。
哪些原因容易導(dǎo)致血清沉淀:
1.溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導(dǎo)致沉淀。
2.血清在室溫或4℃冰箱放置時(shí)間太久,血清中的不穩(wěn)定成分會(huì)被破壞,影響細(xì)胞生長效果;導(dǎo)致血清品質(zhì)變差,也會(huì)產(chǎn)生沉淀。
3.血清分裝凍存時(shí),注意在不產(chǎn)生氣泡的情況下?lián)u晃均勻,避免因血清成分濃度改變產(chǎn)生沉淀。
4.血清滅活后容易產(chǎn)生沉淀,如需使用滅活血清,請按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度過高、時(shí)間過長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
5.如有血清沉淀,分裝后進(jìn)行離心處理,建議400g離心5分鐘,取上清使用。
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