固相萃取的應(yīng)用優(yōu)勢
在什么項目的前處理適合使用固相萃取技術(shù),即用固相萃取會比普通的溶劑萃取更理想,個人認為有以下幾種情況:
(一) 水中有機物的前處理。
此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優(yōu)勢在于
(1)可以定量地重復前處理過程。
溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時間的程度,卻無法控制振蕩頻率,強度,動作,我們知道,每個人的振蕩動作是不同的,就是同一個人,也很難保證始終劃一的動作。所以說,溶液萃取的動作是不定量,不能重復的。
而在應(yīng)用固相萃取時,比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定,因此,固相萃取的萃取過程是可以重復,可定量的。
(2)現(xiàn)場處理。
水中有機物的分析有一個長期困擾我們的瓶頸。即有機物在池塘水庫等環(huán)境中能保持相對穩(wěn)定,但是一旦進入采樣瓶這個小環(huán)境中,就會迅速發(fā)生變化,所以很多水的有機物分析方法要求即采即分析,不能超過4 個小時,可一般的情況是,從取水回到實驗室的時間就遠遠不止4 小時了,樣品發(fā)生了變化,分析結(jié)果的可靠性可想而知。
如果引入固相萃取技術(shù),由于其設(shè)備簡單,體積小,易于攜帶,可以做到在現(xiàn)場一邊采樣,一邊進行前處理。采樣者帶回實驗室的是固相萃取柱,而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩(wěn)定的水樣。
從實際應(yīng)用來說,在水的檢測中用固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當?shù)墓ぷ餍枰?,目前尚不能取代,但是其發(fā)展的前景很值得看好。
(3)有機試劑消耗量的減少。
在處理水樣時,如果用固相萃取,則只需要在洗脫時用到有機溶劑,用量比傳統(tǒng)液液萃取要少數(shù)十倍以上。對于實驗者的人身保護和環(huán)境保護有著積的意義。
二)批量生物材料的藥物成分萃取
這是固相萃取在實際應(yīng)用中比較成功的范例,主要是指在醫(yī)院中檢測血樣和尿樣時的前處理工作,由于對藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢,加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。
(三)免疫親和固相萃取。
萃取的理想狀態(tài)就是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,z多做到“某一類”層次上的萃取,而無法達到“某一種”層次的萃取。
在固相萃取柱的基礎(chǔ)上加上免疫親和技術(shù),可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達到近于理論的萃取。
實際困難在于雖然其概念很好,但是由于技術(shù)難度相對較高,可供應(yīng)用的更少。
三、固相萃取的應(yīng)用局限性
(1)樣品局限性
固相萃取不適于處理固體樣品。對于固體,將其先制備為液體形態(tài)才能進行固相萃取操作,這一點就遠不如液體萃取了。
即使是液體樣品,固相萃取也有其額外的苛刻要求,即液體潔凈度高,不能有懸浮物或其它固體顆粒,否則會在柱前形成堵塞,無法繼續(xù)過柱及洗脫操作。所以固體樣品要制備成液體,液體樣品還要過濾。相比來說,溶劑萃取就不存在這個麻煩,稍臟點也影響不大。
(2)結(jié)構(gòu)局限性
固相萃取柱的結(jié)構(gòu)很簡單,除了塑料管,只有篩板和填料了。就這簡單的結(jié)構(gòu),帶來了便利,也帶來了與生俱來的矛盾,一些我們在用溶劑萃取時永遠不會遇到的矛盾。
矛盾1 液面的問題。
當我們進行活化、凈化,洗脫等典型的固相萃取操作時,會使用不同溶劑,這時的操作要求在液面下降到篩板時換加不同溶劑,加得太晚,會使填料中干涸產(chǎn)生氣泡,影響結(jié)果的穩(wěn)定性(甚至會因為溶液的張力問題而使液面無法下降)。相反,如果加得太晚,會使加入溶液和在篩板上的原有溶液混合,產(chǎn)生一個其實是我們不希望存在的、無法預料性的新洗脫液,使結(jié)果的可靠性大打折扣。
加液加到篩板,說得容易做起來難,如果單獨做一個樣品可以緊盯液面操作。但是在批量操作時只會顧此失彼,固相萃取技術(shù)實用的一個重要意義就在于,其可以方便可靠地批量處理樣品,如果這個意義的話,其實用性也就大大降低。
液面問題是制約固相萃取應(yīng)用成功的主要瓶頸,雖隱蔽卻無法回避。