柯薩奇病毒a24型pcr檢測試劑盒樣品dna的制備:
1.用自選方法純化樣品的dna,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒*兼容。。也可以選購本公司的一管式病毒
dnaout或其升級版柱式病毒 dnaout。本試劑盒免費贈送15次dna病毒裂解液試用裝(一管式病毒 dnaout的成分)。
稀釋陽性對照(以10e2-10e7這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行
干萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只
提供可以直接使用的長為86bp的dn段作為陽性對照。
2.標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2
3用帶芯槍頭分別加入45l模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同
4.在7號管中加入5ul1x10e8持貝l的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10e7拷貝l的陽性對照。放冰上待用。5.換槍
頭,在6號管中加入5ul1×10e7拷貝l的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10e6拷貝μ的陽性對照。放冰
6換槍頭,在5號管中加入5ul1×10e6拷貝l的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10e5拷貝l的陽性對照
放冰上待用。
7換槍頭,在4號管中加5ul1x10e5拷貝l的陽性對照到4號管中,得1×10e4拷貝l的陽性對照。放冰上待用
8.重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置qpcr反應(yīng)(20l體系,在樣品制備室進行
9.在pcr管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且
陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后后加)注意事項