色譜分析技術(shù)的原理和分類

發(fā)布時(shí)間:2024-03-26
色譜技術(shù)在不同的應(yīng)用領(lǐng)域中有不同的稱呼,在分析技術(shù)中叫做色譜分析,在分離技術(shù)中叫做色譜分離。色譜法(chromatography)又稱色譜分析、色譜分析法、層析法,是一種物理化學(xué)分離和物理化學(xué)分析方法,在分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。
它利用不同溶質(zhì)(樣品)與固定相和流動(dòng)相之間的作用力(分配、吸附、離子交換等)的差別,當(dāng)兩相做相對(duì)移動(dòng)時(shí),各溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行多次平衡,使各溶質(zhì)達(dá)到相互分離。所以色譜法是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會(huì)以不同的速度沿固定相移動(dòng),終達(dá)到分離的效果。色譜法體系中的兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),通常其中一個(gè)相是固定不動(dòng)的,稱為固定相;另一相是移動(dòng)的,稱為流動(dòng)相。在色譜分析過程中,物質(zhì)的遷移速度取決于它們與固定相和流動(dòng)相的相對(duì)作用力。溶質(zhì)和兩相的吸引力是分子間的作用力,包括色散力、誘導(dǎo)效應(yīng)、場(chǎng)間效應(yīng)、氫鍵力和路易斯酸堿相互作用。對(duì)于離子,還有離子間的靜電吸引力。被較強(qiáng)吸引在固定相上的溶質(zhì)相對(duì)滯后于較強(qiáng)地吸引在流動(dòng)相中的溶質(zhì),隨著移動(dòng)的反復(fù)進(jìn)行與多次分配,使混合物中的各組分得到分離。
色譜分析法的分類比較復(fù)雜。根據(jù)流動(dòng)相和固定相的不同,色譜法分為氣相色譜法和液相色譜法。
(1)氣相色譜法的流動(dòng)相是氣體,又可分為:氣固色譜法,其流動(dòng)相是氣體,固定相為固體;氣液色譜法,其流動(dòng)相是氣體,固定相是涂在惰性固體上的液體。
(2)液相色譜法的流動(dòng)相是液體,又可分為液固色譜法,其流動(dòng)相是液體,固定相是固體。
(3)液液色譜法,其流動(dòng)相和固定相均是液體。按吸附劑及其使用形式可分為柱色譜、紙色譜和薄層色譜。按吸附力可分為吸附色譜、離子交換色譜、分配色譜和凝膠滲透色譜。按色譜操作終止的方法可分為展開色譜和洗脫色譜。按進(jìn)樣方法可分為區(qū)帶色譜、迎頭色譜和頂替色譜。
色譜法的特點(diǎn):
(1)分離效率高??煞蛛x性質(zhì)十分相近的物質(zhì),可將含有上百種組分的復(fù)雜混合物進(jìn)行分離。
(2)分離速度快。幾分鐘到幾十分鐘就能完成一次復(fù)雜物質(zhì)的分離操作。
(3)靈敏度高。能檢測(cè)含量在10-12g以下的物質(zhì)。
(4)可進(jìn)行大規(guī)模的純物質(zhì)制備。
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