色譜分析技術(shù)的原理和分類

發(fā)布時間:2024-03-26
色譜技術(shù)在不同的應用領域中有不同的稱呼,在分析技術(shù)中叫做色譜分析,在分離技術(shù)中叫做色譜分離。色譜法(chromatography)又稱色譜分析、色譜分析法、層析法,是一種物理化學分離和物理化學分析方法,在分析化學、有機化學、生物化學等領域有著非常廣泛的應用。
它利用不同溶質(zhì)(樣品)與固定相和流動相之間的作用力(分配、吸附、離子交換等)的差別,當兩相做相對移動時,各溶質(zhì)在兩相間進行多次平衡,使各溶質(zhì)達到相互分離。所以色譜法是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動,終達到分離的效果。色譜法體系中的兩相作相對運動時,通常其中一個相是固定不動的,稱為固定相;另一相是移動的,稱為流動相。在色譜分析過程中,物質(zhì)的遷移速度取決于它們與固定相和流動相的相對作用力。溶質(zhì)和兩相的吸引力是分子間的作用力,包括色散力、誘導效應、場間效應、氫鍵力和路易斯酸堿相互作用。對于離子,還有離子間的靜電吸引力。被較強吸引在固定相上的溶質(zhì)相對滯后于較強地吸引在流動相中的溶質(zhì),隨著移動的反復進行與多次分配,使混合物中的各組分得到分離。
色譜分析法的分類比較復雜。根據(jù)流動相和固定相的不同,色譜法分為氣相色譜法和液相色譜法。
(1)氣相色譜法的流動相是氣體,又可分為:氣固色譜法,其流動相是氣體,固定相為固體;氣液色譜法,其流動相是氣體,固定相是涂在惰性固體上的液體。
(2)液相色譜法的流動相是液體,又可分為液固色譜法,其流動相是液體,固定相是固體。
(3)液液色譜法,其流動相和固定相均是液體。按吸附劑及其使用形式可分為柱色譜、紙色譜和薄層色譜。按吸附力可分為吸附色譜、離子交換色譜、分配色譜和凝膠滲透色譜。按色譜操作終止的方法可分為展開色譜和洗脫色譜。按進樣方法可分為區(qū)帶色譜、迎頭色譜和頂替色譜。
色譜法的特點:
(1)分離效率高??煞蛛x性質(zhì)十分相近的物質(zhì),可將含有上百種組分的復雜混合物進行分離。
(2)分離速度快。幾分鐘到幾十分鐘就能完成一次復雜物質(zhì)的分離操作。
(3)靈敏度高。能檢測含量在10-12g以下的物質(zhì)。
(4)可進行大規(guī)模的純物質(zhì)制備。
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