由于細菌各自的酶系統(tǒng)不同，新陳代謝的產(chǎn)物也有所不同，而這些產(chǎn)物又各具有不同的生物化學特性。為此，可利用生物化學的方法來鑒別一些在形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的細菌，這種試驗稱為細菌的生化反應試驗。
1、在培養(yǎng)物中加入某種底物與指示劑，經(jīng)接種、培養(yǎng)后，觀察培養(yǎng)基的ph值變化。
2、在培養(yǎng)物中加入試劑，觀察它們同細菌代謝產(chǎn)物所生成的顏色反應。
3、根據(jù)酶作用的反應特性，測定酶的存在。
4、根據(jù)細菌對理化條件和藥品的敏感性，觀察細菌的生長情況。
生化試驗的注意事項
1、待檢菌應是新鮮培養(yǎng)物。培養(yǎng)18-24h。
2、待檢菌應是純種培養(yǎng)物。
3、遵守觀察反應的時間。觀察結(jié)果的時間，多為24或48小時。
4、應做必要的對照試驗。
5、提高陽性檢出率，至少挑取2-3個待檢的疑似菌落分別進行試驗。
生化試驗分類
（一）糖類代謝試驗
（二）氨基酸和蛋白質(zhì)代謝試驗
（三）有機酸鹽和銨鹽代謝試驗
（四）酶類試驗