急性胰腺炎(acute pancreatitis, ap)是臨床上常見(jiàn)的急腹癥,病因復(fù)雜,病死率達(dá)5%~10%,重癥ap死亡率高達(dá)20%~30%,目前發(fā)病機(jī)制尚未闡述,無(wú)特殊治療方式。目前活體ap動(dòng)物模型制作常用方法大致有胰管結(jié)扎法、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、胰膽管注射法結(jié)合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內(nèi)注射法等。
牛磺膽酸鈉(taurocholicacidsodiumsalt)容易通過(guò)逆行灌注胰腺,模擬膽汁反流,損傷胰腺,誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,sap)。通過(guò)激活nf-κb途徑,引起肺損傷。逆行胰膽管灌注牛黃膽酸鈉是一種經(jīng)典的重癥急性胰腺炎的造模途徑。
圖1牛磺膽酸鈉分子結(jié)構(gòu)(cas .145-42-6)
牛黃膽酸鈉誘導(dǎo)胰腺炎建模步驟(僅供參考)
動(dòng)物:
?;悄懰徕c可以誘導(dǎo)大多數(shù)動(dòng)物發(fā)生ap,但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動(dòng)物(如大鼠和小鼠)。
給藥方式:
?;悄懰徕c可誘導(dǎo)急性壞死胰腺炎,這種模型多伴有多器官功能衰竭,適用于研究ap的局部和全身并發(fā)癥,用于臨床膽汁反流性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制及藥物治療療效的研究,可為研究sap的靶向治療提供工具。
1、將動(dòng)物禁食過(guò)夜,并自由飲用新鮮自來(lái)水。通過(guò)腹腔注射10%氯醛脲(0.3ml/100g)進(jìn)行麻醉。
2、動(dòng)物麻醉后,經(jīng)腸壁穿刺逆行胰膽管注射,正中切口開(kāi)腹,輕拉出十二指腸,順膽胰管尋找十二指腸開(kāi)口,使用穿刺針在近十二指腸開(kāi)口端逆行刺入胰膽管,用動(dòng)脈夾夾住膽管入肝處。
3、以0.1ml/min速度向胰管內(nèi)勻速注射5%?;悄懰徕c溶液(按0.1ml/100g劑量),對(duì)照組使用等量生理鹽水替代牛磺膽酸鈉,注射完畢后留針8-10min,肉眼觀察胰腺顏色變暗紅,拔出穿刺針,松開(kāi)血管夾,并縫合穿刺的十二指腸壁以免腸液漏至腹腔,確認(rèn)腹腔無(wú)活動(dòng)性出血后層層縫皮即可。
模型判定指標(biāo):
注射后3、6、12、24h檢測(cè)血清淀粉酶水平、胰腺組織的濕/干質(zhì)量比率及病理組織學(xué)評(píng)分,觀察24h生存指數(shù)
模型優(yōu)點(diǎn):
病因、致病機(jī)制及病變與臨床急性出血壞死型胰腺炎(ahnp)相似,成功率高,重復(fù)性好,可比性高。但對(duì)操作者的技術(shù)熟練度要求較高。
實(shí)驗(yàn)案例
圖212小時(shí)時(shí)胰腺的形態(tài)學(xué)變化和每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的胰腺組織學(xué)評(píng)分(引用自:dx.doi.org/10.1155/2015/685043)
實(shí)驗(yàn)采用雄性spf wistar大鼠,體重200~250g,穿刺逆行胰膽管注射5%?;悄懰徕c溶液誘導(dǎo)sap,在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行胰腺h&e病理切片染色,對(duì)胰腺病理進(jìn)行評(píng)分。
相關(guān)產(chǎn)品
分類
產(chǎn)品名稱
貨號(hào)
規(guī)格
胰腺炎建模試劑
caerulein雨蛙素
60321es03
1 mg
taurocholic acid sodium salt?;悄懰徕c
60398es03/08/25
1/5/25g
l-arginine l-精氨酸
61302es60/76
100/500g
其他試劑
sodium cloride氯化鈉
60372es76/96
500g/25kg
dmso二甲基亞砜(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))
60313es60
100 ml
hematoxylin and eosin staining kit蘇木素伊紅(h&e)染色試劑盒
60524es60
2×100 ml
相關(guān)專題
1.雨蛙素誘發(fā)的急性胰腺炎動(dòng)物模型
2.l-精氨酸誘導(dǎo)胰腺炎模型(acutepancreatitis,ap)