全光譜分光光度計的使用技巧

發(fā)布時間:2024-03-25
全光譜分光光度計的使用技巧
全光譜分光光度計其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進行檢測。
全光譜分光光度計主要檢測葡萄酒中有害元素及營養(yǎng)元素。幾乎可以檢測化學周期表中所有的金屬元素,用石墨爐時的檢測能力可達10ˉ9數(shù)量級,等同于2個半籃球場中有1粒沙大小的金屬元素,它都能檢測出來。近年來共檢測出葡萄酒等59批次鎘、鐵、銅、錳元素超標的不合格產(chǎn)品。
全光譜分光光度計的使用技巧
一、主要項目對分析結(jié)果的影響
1)波長準確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對波長準確度要求允許寬些。但是,當吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時波長準確度的影響就必須引起注意。
2)透射比(吸光度)準確度
很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準確性。
3)雜散光
雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。
使用與維護
1)若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進行機械調(diào)零。
3)比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5)由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,因此在預熱時,應打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。
7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用,若超出此范圍應考慮其對測試結(jié)果的影響。
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