豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒操作步驟

發(fā)布時間:2024-03-13
豬內(nèi)皮素1(et-1)elisa試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48t的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48t的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。 測定應在加終止液后15分鐘。
腺苷受體a3抗體
adra2腎上腺素能受體2抗體
腎上腺素能受體β1抗體
腎上腺素能受體β2/β2-ar抗體
晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體
軟骨蛋白聚糖抗體
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
p53凋亡刺激蛋白1抗體
p53凋亡刺激蛋白2抗體
激活素受體2b抗體
aimp2抗體
乙酰膽堿酶抗體
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
防御素α1/3抗體
abc膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體
植物延長蛋白(擬南芥)
a-raf抗體
磷酸化a-raf抗體
紅細胞腺苷脫氨酶3抗體
雄激素結(jié)合蛋白抗體
肝再生增強因子抗體
app/abpp淀粉樣肽前體蛋白抗體
甲胎蛋白單克隆抗體(包被)
甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)
adp核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體
上一個:RC1218FK-0764R9L,1218 64.9Ω 1.0%電阻
下一個:傳感器檢測常用行之有效的抗干擾技術

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