大鼠17-羥孕烯醇酮elisa酶聯(lián)免疫試劑盒基本原理：
1.使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。
2.使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關，故可根據(jù)顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。因此，elisa檢測是一項定位、定性和定量的綜合技術。
大鼠17-羥孕烯醇酮elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測樣品10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑a50µl，再加入顯色劑b50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50µl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（od值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
計算和結(jié)果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10
臨界值（cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品od值<臨界值（cut off）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(se)陰性陽性判定：樣品od值≥臨界值（cut off）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(se)陽性。