海洋微生菌種物注意事項
⒈ 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或bsa等封閉。
⒉ 在elisa中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
⑴ 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當(dāng)前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
⑵ 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求ph在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的od值。選擇od值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
⑶ 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接elisa法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
⑷ 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如opd等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如tmb和abts是當(dāng)前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是h2o2在臨用前加入。
海洋微生菌種物人3-羥基-3-甲基戊二酰*合酶1(hmgcs1)elisa試劑盒 il-8/cxcl8(mouse interleukin 8) elisa kit 小鼠白介素8 進口/分裝
人嗜酸性白血球相關(guān)之rna水解酵素家族成員12(ear12)elisa試劑盒 hif-1 alpha elisa kit 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α 進口/分裝
人嗜酸性白血球相關(guān)之rna水解酵素家族成員3(ear3)elisa試劑盒 amylin elisa kit 大鼠胰淀素 進口/分裝
人嗜酸性白血球相關(guān)之rna水解酵素家族成員2(ear2)elisa試劑盒 cyclin-d3(mouse cyclin-d3) elisa kit 小鼠細胞周期素d3 進口/分裝
人二氫嘧啶酶樣3(dpysl3)elisa試劑盒 ck-18(human cytokeratin 18) elisa kit 人細胞角蛋白18 進口/分裝
人色氨酰trna合成酶(wars)elisa試劑盒 cyclin-d2(mouse cyclin-d2) elisa kit 小鼠細胞周期素d2 進口/分裝
人己糖激酶3(hk3)elisa試劑盒 cga(human chromogranin) elisa kit 人嗜鉻蛋白a 進口/分裝
人血小板型磷酸果糖激酶(pfkp)elisa試劑盒 ltc4 elisa kit 大鼠白三烯c4 進口/分裝
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(ugcg)elisa試劑盒 cyt-c elisa kit 大鼠* 進口/分裝
人凋亡相關(guān)半*肽酶4(casp4)elisa試劑盒 prb(human retinoblastoma tumor suppressor protein) elisa kit 人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白 進口/分裝
人吡哆醛/吡哆醇*6激酶(pdxk)elisa試劑盒 e(mouse estrogen) elisa kit 小鼠雌激素 進口/分裝
人二氫嘧啶酶樣2(dpysl2)elisa試劑盒 ang- i elisa kit 大鼠血管緊張素ⅰ 進口/分裝
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(gsk2)elisa試劑盒 cyclin-d1(mouse cyclin-d1) elisa kit 小鼠細胞周期素d1 進口/分裝
人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(mkk6)elisa試劑盒 mbp(mouse myelin basic protein) elisa kit 小鼠髓磷脂堿性蛋白 進口/分裝
人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶(pdxp)elisa試劑盒 mpf(human maturation promoting factor) elisa kit 人成熟促進因子 進口/分裝
人t細胞特異性鳥苷三磷酸酶(tgtp)elisa試劑盒 mc ab elisa kit 大鼠黑色素細胞抗體 進口/分裝
人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(fdft1)elisa試劑盒 tgf- alpha(mouse transforming growth factor alpha) elisa kit 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α 進口/分裝
人d-乳酸脫氫酶(d-ldh) elisa試劑盒 asgpr(human asialoglyco protein receptor) elisa kit 人去唾液酸糖蛋白受體 進口/分裝
人α1抗*(α1-at)elisa試劑盒 dpp iv elisa kit 大鼠二肽基肽酶ⅳ 進口/分裝
人*1(klk 1)elisa試劑盒 c4a elisa kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a 進口/分裝
人磷酸化乙酰*(pacoa)elisa試劑盒 stfr(human soluble transferrin receptor) elisa kit 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 進口/分裝
人磷酸甘油酸變位酶2(pgam2)elisa試劑盒 afp(mouse alpha-fetoprotein) elisa kit 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 進口/分裝
人前列腺素d合成酶(ptgds)elisa試劑盒 mt(human metallothionein) elisa kit 人金屬硫蛋白 進口/分裝
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(ppil1)elisa試劑盒 pap(mouse prostatic acid phosphatase) elisa kit 小鼠前列腺酸性磷酸酶 進口/分裝
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(mapkapk3)elisa試劑盒 c elisa kit 大鼠補體片斷 進口/分裝
人血管緊張素ⅰ轉(zhuǎn)化酶(aceⅰ)elisa試劑盒 c3a elisa kit 大鼠補體片斷3a 進口/分裝海洋微生菌種物