藍(lán)萼香茶菜隨機擴增多態(tài)dna(rapd)反應(yīng)體系優(yōu)化

發(fā)布時間:2023-09-04
試驗以香茶菜屬植物的藍(lán)萼香茶菜[isodon ja ponica (burm.f.)hara var.glaucocalyx (maxim.)]為材料,采用改進(jìn)的ctab法提取基因組dna,首次建立適合于藍(lán)萼香茶菜的rapd(random amplified polymorphic nda,隨機擴增的多態(tài)性)分析的pcr反應(yīng)體系。通過對rapd條件優(yōu)化分析,確定藍(lán)萼香茶菜rapd的最佳方案為:25μl反應(yīng)體系中包括三磷酸脫氧核苷酸(dntps)0.1mmol/l,引物0.4μmol/l,模板dna90ng,taq酶(sangon)3u,2.5μ110×buffer緩沖液(含20mmol/l mg^2+),其余部分用無菌超純水補平;pcr擴增循環(huán)為93c預(yù)變性4min,93c變性45s,36c復(fù)性75s,72c延伸2min,40個循環(huán),最后72c延伸10min。完成機構(gòu):齊齊哈爾大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,黑龍江齊齊哈爾161006
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