茶堿、咯利普蘭和acetamide—45對gl62酵母細胞表達的人磷酸二酯酶4a的抑制作用

發(fā)布時間：2024-02-29

目的：研究gl62酵母細胞中磷酸二酯酶4a（pde4a）的誘導表達和茶堿、咯利普蘭、n－對氟芐基－3－[(n-4-吡啶）－乙酰胺]-吲哚45（acetamide-45)對gl62酶母細胞誘導提取物中pde4a活性的抑制作用。方法：克隆了人pde4a基因的gl62酵母細胞在cuso4 150μmol/l條件下誘導表達pde4a并提取，用高效液相色譜法測定pde4a的活性。結果：gl62酵母細胞在cuso4誘導下的表達產物蛋白分子在62kda和83kda之間，表達產物的pde4a的活性在3h達到最大為（188±23）μmol·g^-1·min^-1，其米氏常數km為（17．7±2．6）μmol·l^-1.茶堿，咯利普蘭和acetamide-45對誘導提取物pde4a活性的ic50（95％可信限）分別為1642（989－2727），4．58（3．45－6．08）和275（170－444）μmol·l^-1。結論：gl62酵母細胞經cuso4誘導可表達pde4a，茶堿、咯利普蘭和acetamide-45能抑制其活性，gl62酵母細胞的誘導表達提取物可用來研究pde4a及其抑制劑。完成機構：浙江大學醫(yī)學院國家藥品監(jiān)督管理局呼吸藥物研究實驗室，杭州310031，中國