目的
使用沃特世（waters®）acquity upc-squared™系統(tǒng)將藥典中*含量的正相hplc測(cè)定方法轉(zhuǎn)換為超臨界流體色譜（sfc）方法。
背景
目前，美國(guó)藥典（usp）規(guī)定了含有*（4,4’-二氨基二苯砜，cas#80-08-0）藥物片劑的正相hplc分析方法。使用4.0x300mm，10µm的硅膠柱（l3）進(jìn)行等度分離，流動(dòng)相為正己烷、異丙醇、乙腈和乙酸乙酯（7:1:1:1）的混合溶液。該方法的運(yùn)行時(shí)間約為12.5min（zui后一個(gè)主峰出峰時(shí)間的2倍，流速1.5ml/min）。如大多數(shù)藥典中的方法一樣，本方法經(jīng)過(guò)驗(yàn)
證且可靠。但是，該方法使用了正己烷和乙酸乙酯溶劑。出于健康、安全和環(huán)保的原因，許多實(shí)驗(yàn)室都想減少這些溶劑的使用。超臨界液體色譜（sfc）是一種正相色譜分離技術(shù)，其使用co2作為主流動(dòng)相，以極性溶劑（如甲醇）作為改性劑。由于sfc的原理與hplc的原理相似，因此，目前的方法應(yīng)該能夠轉(zhuǎn)換成sfc方法，減少溶劑的消耗和處理，降低每次分析的成本，同時(shí)增強(qiáng)了健康、安全和環(huán)境方面的保護(hù)。轉(zhuǎn)換成sfc的色譜方法必須保持?jǐn)?shù)據(jù)質(zhì)量，而且必須得到與目前正相色譜
方法一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
對(duì)尋求更、更低成本的*片分析方法的實(shí)驗(yàn)室而言，acquity upc-squared系統(tǒng)不愧為理想之選，該方法同時(shí)加強(qiáng)了健康、安全和環(huán)境方面的保護(hù)。
解決方案
使用目前美國(guó)藥典（usp）方法，制備和分析*標(biāo)準(zhǔn)品和片劑樣品，如圖1所示（該樣品也用于sfc分析）。使用目前usp方法的分析結(jié)果與使用acquity upc2方法得到的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，如圖2所示。
sfc方法的條件如下：
色譜柱：acquity upc 2beh，3.0x50mm，1.7µm
柱溫：45°c
流動(dòng)相：85%co2:15%meoh
流速：3.0ml/min,
背壓：130bar/1885psi
檢測(cè)器：uv/pda，254nm
藥典方法所列出的適應(yīng)性條件是zui低要求（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不得大于2%）。標(biāo)準(zhǔn)品6次重復(fù)進(jìn)樣，目前正相hplc方法得到的保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）分別為<0.1%，<1.1%。超合相色譜方法ultra performance convergence chromatography™（upc-squared）重復(fù)6次進(jìn)樣得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合usp藥典系統(tǒng)適應(yīng)性要求（保留時(shí)間rsd值0.8%，峰面積rsd值0.9%），且運(yùn)行速度（1.75min）大大加快。兩種方法測(cè)定片劑樣品的分析結(jié)果高度一致。本例中，每次正相hplc分析使用正己烷13.1ml，異丙醇、乙腈和乙酸乙酯各1.9ml。相比之下，upc2方法僅消耗約0.50ml甲醇。這說(shuō)明了通過(guò)將正相
色譜方法轉(zhuǎn)換為upc-squared方法可以大大地減少有機(jī)溶液的使用。根據(jù)目前的溶劑價(jià)格，每次正相色譜hplc分析成本大約為1.08美元；相比之下，upc-squared僅為0.01美元。
總結(jié)
使用acquity upc-squared，可以成功地將美國(guó)藥典的hplc方法轉(zhuǎn)換為upc-squared方法。這種新的upc-squared方法得到的數(shù)據(jù)與目前的hplc方法相當(dāng)，甚至更好；速度是目前的hplc方法的7倍，并且消耗的溶劑更少。我們以更快的速度得到高品質(zhì)的分析數(shù)據(jù)，則實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)率提高，每個(gè)樣本的分析成本降低。acquity upc-squared系統(tǒng)是實(shí)驗(yàn)室將目前的正相hplc方法轉(zhuǎn)換為更、更省錢的upc-squared的方法的一種理想的解決方案，同時(shí)也增強(qiáng)了健康、安全和環(huán)境方面的保護(hù)。