本研究采用est測(cè)序技術(shù)和rt—pcr技術(shù)，獲得了一個(gè)茶樹茶多酚代謝中的重要基因——黃酮醇合成酶（fls）基因，在genbank登錄（genbank accession no．ef205150），其序列全長(zhǎng)1317bp，其中開放閱讀框長(zhǎng)996bp，編碼331個(gè)氨基酸，3]端有一個(gè)明顯的多聚腺苷酸加尾信號(hào)，推測(cè)的蛋白分子量約為37．5kd，理論等電點(diǎn)為5．80。序列分析表明它與葡萄fls基因序列的親緣關(guān)系比較近。將該基因重組到表達(dá)載體pet-32a（＋）中進(jìn)行原核表達(dá)，經(jīng)iptg誘導(dǎo)、sds-page檢測(cè)，結(jié)果表明茶樹黃酮醇合成酶基因能在大腸桿菌bl21中表達(dá)，電泳檢測(cè)到一條大約61kd的外源蛋白，與預(yù)測(cè)的融合蛋白分子量相符。用ni-nta親和層析柱對(duì)融合蛋白進(jìn)行純化，得到了純度在90%以上的純化蛋白，為進(jìn)一步研究pet-fls融合蛋白的活性及功能奠定了基礎(chǔ)。完成機(jī)構(gòu)：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所茶樹資源與改良研究中心,國(guó)家茶樹改良中心,杭州310008