海洋微生物菌種驟進(jìn)行操作:
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對(duì)于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。
收集完蛋白樣品后,為確保每個(gè)蛋白樣品的上樣量一致,需要測(cè)定每個(gè)蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y(cè)定方法。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y(cè)定方法對(duì)于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
(1)、sds-page凝膠配制
sds-page凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資料進(jìn)行配制,也可以使用博研生物生產(chǎn)的sds-page凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度sds-page的配方。
(2)、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的sds-page蛋白上樣緩沖液。例如2x或5x的sds-page蛋白上樣緩沖液。使用5x的sds-page蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積,在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品。5x的sds-page蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻(xiàn)資料配制,也可以使用我公司生產(chǎn)的sds-page蛋白上樣緩沖液(5x) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
(3)、上樣與電泳
冷卻到室溫后,把蛋白樣品直接上樣到sds-page膠加樣孔內(nèi)即可。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果,以及判斷蛋白分子量大小,使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。
電泳時(shí)通常推薦在上層膠時(shí)使用低電壓恒壓電泳,而在溴酚藍(lán)進(jìn)入下層膠時(shí)使用高電壓恒壓電泳。對(duì)于bio-rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類似電泳裝置,低電壓可以設(shè)置在80-100v,高電壓可以設(shè)置在120v左右。sds-page可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見(jiàn),也可以采用整個(gè)sds-page過(guò)程恒壓的方式,通常把電壓設(shè)置在100v,然后設(shè)定定時(shí)時(shí)間為90-120分鐘。設(shè)置定時(shí)可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過(guò)頭。
通常電泳時(shí)溴酚藍(lán)到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳,或者可以根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的電泳情況,預(yù)計(jì)目的蛋白已經(jīng)被適當(dāng)分離后即可停止電泳。
海洋微生物菌種英文名稱 homo sapiens (human) 血小板因子4v1(pf4v1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 oryctolagus cuniculus (rabbit) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 mus musculus (mouse) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 rattus norvegicus (rat) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 bos taurus; bovine (cattle) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 capra hircus; caprine (goat) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 sus scrofa; porcine (pig) 血小板因子4(pf4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子受體樣蛋白(pdgfrl)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 mus musculus (mouse) 血小板衍生生長(zhǎng)因子受體樣蛋白(pdgfrl)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β(pdgfrβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子受體α(pdgfrα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 rattus norvegicus (rat) 血小板衍生生長(zhǎng)因子受體α(pdgfrα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子d(pdgfd)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子c(pdgfc)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 mus musculus (mouse) 血小板衍生生長(zhǎng)因子c(pdgfc)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子bb(pdgfbb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子b(pdgfb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 rattus norvegicus (rat) 血小板衍生生長(zhǎng)因子b(pdgfb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 sus scrofa; porcine (pig) 血小板衍生生長(zhǎng)因子b(pdgfb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 mus musculus (mouse) 血小板衍生生長(zhǎng)因子b(pdgfb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子ab(pdgfab)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子aa(pdgfaa)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 oryctolagus cuniculus (rabbit) 血小板衍生生長(zhǎng)因子a(pdgfa)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板衍生生長(zhǎng)因子a(pdgfa)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 mus musculus (mouse) 血小板衍生生長(zhǎng)因子a(pdgfa)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 rattus norvegicus (rat) 血小板衍生生長(zhǎng)因子a(pdgfa)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板型磷酸果糖激酶(pfkp)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t
英文名稱 homo sapiens (human) 血小板生成素(tpo)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48t/96t海洋微生物菌種