非洲豬瘟病毒熒光pcr檢測(cè)試劑盒[風(fēng)途配件提供]ft-zwsj2frikansk svinpestvirus fluorescerande pcr-detektionssats在豬的方面，養(yǎng)豬人在引種時(shí)一定要注意隔離和檢測(cè)，且平時(shí)要做好相關(guān)的排查工作，如果發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)體表發(fā)紺、耳朵或體表出現(xiàn)紫斑、毛孔出血、厭食、腹瀉等癥狀時(shí)，要提高警惕，好是采樣送到相關(guān)的非洲豬瘟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：病毒*
英文名稱：extraction kit for virus dna
【預(yù)期用途】
本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環(huán)境中的病毒dna的提取，純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及pcr試驗(yàn)。
【試劑盒組分】
i、試劑盒組成及貯藏條件
名稱
20t
50 t
1、吸附柱
20個(gè)
50個(gè)
2、收集管
20個(gè)
50個(gè)
3、裂解液
5ml
11 ml
4、洗液i
13ml
32 ml
5,洗液ii
13ml
32 ml
6.洗脫液
1.2 ml
3 ml
2、 保存條件及有效期：室溫下保存，有效期12個(gè)月.
3、 需自備材料：無水乙醇、1.5 ml無菌離心管、1.5 ml無菌離心管(長(zhǎng)臂型)、生理鹽水、研缽、無菌
1ml, 2ooul、10ul槍頭、記號(hào)筆等。
【操作步驟】
一、樣品制備
1、 血液樣品：抗凝血樣品置離心管中，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中，待凝固后，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血清，置于滅菌離心管中，編號(hào)待檢。
2、 組織樣品：采集脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨，加入1 ml生理鹽水混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心骨中，編號(hào)待檢。
3、 口腔液：進(jìn)食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團(tuán)吸引動(dòng)物咀嚼，收集口腔液大于 500ul， 8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號(hào)待檢。
4、 飼料：取適量研磨后的飼料(約0.2g)，放入含1 ml生理鹽水或pbs(ph為7.4)緩沖液的2 ml ep 管屮，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中,編號(hào)待檢.
5、 灰塵：用無菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵，放入含1 ml生理鹽水或pbs(ph為7.4)緩沖液的2 ml ep管中，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號(hào)待檢。
二、dna的提取
1、取裂解液200ul加入無核酸酶1.5 ml離心曾屮，分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200ul. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次，室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時(shí).需放置25c水浴溫育)，再加入200ul無水乙醇，顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理，取上清液，以避免堵塞柱子;
2、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中， 12000rpm離心1分鐘：
3、 棄收集管液體，向吸附柱中加600ul洗液i , 12000 rpm離心1分鐘;
4、 棄收集管液體，向吸附柱中加600ul洗液ii， 12000 rpm離心i分鐘;
5、 棄收集管液體，12000 rpm離心2分鐘，以*去除殘留洗液;
6、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無核酸酸1.5mlep管(長(zhǎng)臂型)中，向柱滴加50 ul洗脫液，靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘，ep管中液體即為病毒dna。
【注意事項(xiàng)】
1、 實(shí)驗(yàn)前諾仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書，嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行.在操作過程中對(duì)時(shí)間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結(jié)果。
2, 樣本應(yīng)新鮮采集使用，或低溫運(yùn)輸儲(chǔ)存;
3, 樣本具有潛在感染風(fēng)險(xiǎn)，核酸的提取應(yīng)在核酸提取實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)行。
4、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌，提取后核酸盡快進(jìn)入下一步試驗(yàn)或冷凍保存待用。
5, 試劑使用前應(yīng)混合均勻，試劑具有一定腐蝕性，使用時(shí)請(qǐng)戴手套、做好防護(hù)。
6. 低溫下裂解液出現(xiàn)結(jié)晶數(shù)屬正常現(xiàn)象，可在60°c水浴加熱助溶后使用。
7、 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時(shí)收集，遠(yuǎn)離pcr實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無害化處理。