通過優(yōu)化影響茶樹issr．pcr的主要參數(shù)，確立了適用于茶樹的issr反應體系和擴增條件。結果表明在20μl反應體系中，模板dna、引物、mg^++、dntp和taqdna聚合酶五種主要成分的最適濃度分別為10ng、150nmol／l、1．5mmol／l、150gmol／l、0．5u。在擴增過程中，引物的適宜退火溫度比其tm值平均高4．5℃，擴增出足量產物至少需要30個熱循環(huán)。利用該優(yōu)化反應體系和擴增條件，對13份不同茶樹種質資源進行issr-pcr擴增，擴增產物的多態(tài)性為77．6％。引物tri18構建的issr指紋圖譜，可以區(qū)分13份茶樹資源中的12份，分辨率達92．3％。完成機構：中國農業(yè)科學院茶葉研究所，農業(yè)部茶葉化學工程重點實驗室，浙江杭州310008