如何選擇ATCC細(xì)胞術(shù)常用的熒光素 ?

發(fā)布時(shí)間:2024-02-14
atcc細(xì)胞儀測(cè)定常用的熒光染料有很多種,我們?nèi)绾蝸?lái)選擇atcc細(xì)胞儀測(cè)定的常用熒光染料呢?以下簡(jiǎn)單介紹了熒光素選擇的幾個(gè)原則。
1. 抗原的密度
① 高表達(dá)的抗原可選擇幾乎所有的熒光素;
② 低密度表達(dá)的抗原需要可提供較高s/n比值的熒光素如pe/apc。
2. 自發(fā)熒光
① 每種細(xì)胞群都有不同水平的自發(fā)熒光;
② 所有的熒光通道均可觀察到自發(fā)熒光,但自發(fā)熒光強(qiáng)度在波長(zhǎng)較長(zhǎng)時(shí)迅速降低;
③ 對(duì)自發(fā)熒光較強(qiáng)的細(xì)胞,選擇發(fā)射波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光素(如apc)可得到較好的s/n比值;
④ 對(duì)自發(fā)熒光比較弱的細(xì)胞,發(fā)射波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光素對(duì)s/n提高沒(méi)有明顯的改善。可選用fitc。
3. atcc細(xì)胞非特異結(jié)合
① 許多熒光抗體可產(chǎn)生低水平的非特異結(jié)合,使陰性細(xì)胞群的熒光超出自發(fā)熒光;
② 非特異結(jié)合由下列因素引起:
單克隆抗體的同型抗體:一些igg同型抗體可能與一些細(xì)胞上的fc受體結(jié)合;
所用的熒光素:羰花青染料(如cy3、cy5、cy5.5、cy7)和tex-red直標(biāo)的抗體及一些復(fù)合染料標(biāo)記的抗體在標(biāo)記某些亞群的細(xì)胞時(shí)有時(shí)會(huì)提高結(jié)合率;對(duì)cy5來(lái)說(shuō),是因?yàn)樵撊玖吓c低親和力fc受體的極低親和力相互作用。這也是復(fù)合染料pe-cy5的特性。
110877-200001 含量測(cè)定 20mg 兒茶素
110878-200102 含量測(cè)定 20mg 表兒茶素
110879-200202 含量測(cè)定 20mg 腺苷
110882-200605 含量測(cè)定 20mg 木蘭脂素
110883-200502 含量測(cè)定 20mg 葫蘆巴堿
110886-200001 含量測(cè)定 20mg 腺嘌呤
110887-200202 薄層鑒別 20mg 尿苷
110888-200503 含量測(cè)定 20mg 環(huán)維黃楊星d
110889-200102 鑒別 100mg 蘇氨酸
atcc細(xì)胞
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